Association of the D2 dopamine receptor third cytoplasmic loop with spinophilin, a protein phosphatase-1-interacting protein.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

D2 sınıfı dopamin reseptörleri aracılığıyla sinyal vermek, beyin gelişimini ve işlevini düzeltmek için çok önemlidir ve bu sistemin işlev bozukluğu Parkinson hastalığı ve şizofreni gibi büyük nörolojik bozukluklarda yer alır. D2 reseptör regülasyonunun potansiyel yeni mekanizmalarını araştırmak için, D2 dopamin reseptörünün üçüncü sitoplazmik döngüsü, bir sıçan hipokampal mayası iki hibrid kütüphanesini görüntülemek için kullanıldı. Spinofilin, yakın zamanda karakterize edilen F-aktin ve protein fosfataz-1 bağlayıcı protein tek bir PDZ etki alanına sahip, özellikle D2 reseptörlerinin bu bölgesi ile ilişkili bir protein olarak tanımlanmıştır. Spinofilin ve D2 reseptörü arasındaki doğrudan etkileşim, rekombinant füzyon proteinleri kullanılarak in vitro olarak doğrulandı. D2 üçüncü sitoplazmik döngü ile etkileşimden sorumlu spinofilin kısmı, aktin bağlayıcı etki alanını, PDZ etki alanını veya bobinli bobini içermeyen bir bölgeye daraltıldı. Bu bölge, protein fosfataz-1 ile etkileşim alanından farklıdır ve hem D2 reseptörleri hem de protein fosfataz-1 aynı anda spinofilini bağlayabilir. Etkileşim, D2long'daki benzersiz 29-amino asit eki aracılığıyla aracılık etmez; hem D2long hem de D2short üçüncü sitoplazmik döngüler, spinofilin in vitro ve maya iki-hibrit tahlillerde etkileşime girer. Madin-Darby kanin böbrek hücrelerinde hücre dışı hemaglutinin epitopu içeren D2 reseptörlerinin ekspresyonu, spinofilin ve HA etiketine yönelik antikorları kullanarak immünositokimya tarafından belirlenen reseptör ve endojen spinofilin birlikte lokalizasyonu ile sonuçlanır. Spinofilin, reseptörleri aşağı sinyal molekülleri ve aktin sitoskeleton ile bağlayarak D2 reseptörleri aracılığıyla dopaminerjik nörotransmisyon için bir sinyal kompleksi oluşturmak için önemli olduğunu varsayıyoruz.

Özgün kaynak özetini okuyun

Signaling through D2 class dopamine receptors is crucial to correct brain development and function, and dysfunction of this system is implicated in major neurological disorders such as Parkinson's disease and schizophrenia. To investigate potential novel mechanisms of D2 receptor regulation, the third cytoplasmic loop of the D2 dopamine receptor was used to screen a rat hippocampal yeast two-hybrid library. Spinophilin, a recently characterized F-actin and protein phosphatase-1-binding protein with a single PDZ domain was identified as a protein that specifically associates with this region of D2 receptors. A direct interaction between spinophilin and the D2 receptor was confirmed in vitro using recombinant fusion proteins. The portion of spinophilin responsible for interacting with the D2 third cytoplasmic loop was narrowed to a region that does not include the actin-binding domain, the PDZ domain, or the coiled-coil. This region is distinct from the site of interaction with protein phosphatase-1, and both D2 receptors and protein phosphatase-1 may bind spinophilin at the same time. The interaction is not mediated via the unique 29-amino acid insert in D2long; both D2long and D2short third cytoplasmic loops interact with spinophilin in vitro and in yeast two-hybrid assays. Expression of D2 receptors containing an extracellular hemagglutinin epitope in Madin-Darby canine kidney cells results in co-localization of receptor and endogenous spinophilin as determined by immunocytochemistry using antibodies directed against spinophilin and the HA tag. We hypothesize that spinophilin is important for establishing a signaling complex for dopaminergic neurotransmission through D2 receptors by linking receptors to downstream signaling molecules and the actin cytoskeleton.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.