Caspase-mediated parkin cleavage in apoptotic cell death.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Parkin proteini, parkin genindeki hastalığa neden olan lezyonların gösterdiği gibi Parkinson hastalığında dejenere olan nöronların hayatta kalması için önemlidir. Çin hamster yumurtalık ve SH-SY5Y hücre hattı, epitope özgü parkin antikorları ile kombine rekombinant insan parkinini stabil bir şekilde ifade ederek, apoptoz sırasında insan parkinin immünoblotlama ile proteolitik işlenmesini araştırmak için kullanılmıştır. Parkin, okadaik asit, staurosporin ve kamptothecin tarafından indüklenen apoptoz sırasında parçalanır, böylece 38-kDa C-terminal parça ve 12-kDa N-terminal parça oluşur. Dekolte, hastalığa neden olan mutasyonlardan K161N, G328E, T415N ve G430D ve polimorfizm R366W'den önemli ölçüde etkilenmemiştir. Parkin ve 38-kDa proteolitik parçası tercihen veziküllerle ilişkilidir, böylece dekolmanın zarla ilişkili bir olay olduğunu gösterir. Proteoliz, kaspaz inhibitörlerine karşı hassastır. Bölünme alanı, potansiyel aspartik kalıntıların site yönlendirmeli mutajeneziyle haritalandı ve Asp-126 mutasyonunun parkin bölünmeyi ortadan kaldırdığını ortaya koydu. Hipopeptid aldehit LHTD-CHO, amino asit dizisi N-terminal'i putatif dekolman bölgesine temsil eden parkin dekolmanının etkili bir inhibitörüydü. Bu, parkin fonksiyonunun artmış kaspaz aktivasyonu ile ilişkili nöropatolojik durumlarda tehlikeye girdiğini ve böylece hücresel strese daha fazla katkıda bulunduğunu göstermektedir.

Özgün kaynak özetini okuyun

The parkin protein is important for the survival of the neurons that degenerate in Parkinson's disease as demonstrated by disease-causing lesions in the parkin gene. The Chinese hamster ovary and the SH-SY5Y cell line stably expressing recombinant human parkin combined with epitope-specific parkin antibodies were used to investigate the proteolytic processing of human parkin during apoptosis by immunoblotting. Parkin is cleaved during apoptosis induced by okadaic acid, staurosporine, and camptothecin, thereby generating a 38-kDa C-terminal fragment and a 12-kDa N-terminal fragment. The cleavage was not significantly affected by the disease-causing mutations K161N, G328E, T415N, and G430D and the polymorphism R366W. Parkin and its 38-kDa proteolytic fragment is preferentially associated with vesicles, thereby indicating that cleavage is a membrane-associated event. The proteolysis is sensitive to inhibitors of caspases. The cleavage site was mapped by site-directed mutagenesis of potential aspartic residues and revealed that mutation of Asp-126 alone abrogated the parkin cleavage. The tetrapeptide aldehyde LHTD-CHO, representing the amino acid sequence N-terminal to the putative cleavage site was an efficient inhibitor of parkin cleavage. This suggests that parkin function is compromised in neuropathological states associated with an increased caspase activation, thereby further adding to the cellular stress.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.