NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
PARK7 gen kodlaması DJ-1'deki mutasyonlar otozomal resesif Parkinson hastalığına neden olur. En zararlı nokta mutasyonu, bir kink ile ayrılmış iki alfa-helik (G ve H) içeren bir yapı motifinde bulunan L166P ikamesidir. Burada C-terminal helix-kink-helix motifini sistematik site yönlendirmeli mutajeneze tabi tuttuk, helix-uyumsuz proline artıklarını ve ayrıca helisel arayüze muhafazakar ikameleri tanıttık. Ayrıca, H-helix, kink ve tüm C sonlanımlarından yoksun silme mutantları ürettik. Sinirsel ve sinirsel olmayan hücre hatlarına aktarıldığında, G-helix kırılması ve kink silme mutantlarının sabit durum seviyeleri, vahşi tip DJ-1'den önemli ölçüde daha düşüktü. H-helix kırıcıların etkileri karşılaştırılabilir şekilde daha küçüktü ve sarmal olmayan kırma mutantları sadece biraz dengesizleştirilmiş DJ-1 idi. Azalan sabit durum seviyeleri, kısmen proteazom içeren hızlandırılmış protein bozulmasından kaynaklanıyordu. G-helix kırma DJ-1 mutasyonları dimer oluşumunu kaldırdı. Bu yapısal pertürbasyonlar DJ-1'in sitoprotektif faaliyetleri üzerinde işlevsel sonuçlar doğurdu. Dengesizleştirici mutasyonlar, geçici olarak yeniden aktarılmış DJ-1 nakavt faresi embriyonik fibroblastlarında H(2)O(2)'ya karşı azaltılmış sitoproteksiyon sağladı. DJ-1 mutantlarının C-terminal mutasyonlarını istikrarsızlaştıran hayatta kalma aktivitesinin kaybı, bozulmuş anti-apoptotik sinyalleme ile ilişkiliydi. Vahşi tip olduğunu bulduk, ancak mutant DJ-1 değil, Akt yolunu kolaylaştırdı ve aynı anda DJ-1'in redoks bağımlı bir şekilde etkileşime girdiği apoptoz sinyal düzenleyici kinaz 1'i engelledi. Bu nedenle, G-helix ve kink, stabilite ve Parkinson hastalığı ile ilişkili protein DJ-1'in hayatta kalma teşvik edici redoks sinyallemesinin düzenlenmesi için kesinlikle gerekli olan C-terminal helezon-kink-helix motifinin kritik belirleyicileridir.
Özgün kaynak özetini okuyun
Mutations in the PARK7 gene encoding DJ-1 cause autosomal recessive Parkinson disease. The most deleterious point mutation is the L166P substitution, which resides in a structure motif comprising two alpha-helices (G and H) separated by a kink. Here we subjected the C-terminal helix-kink-helix motif to systematic site-directed mutagenesis, introducing helix-incompatible proline residues as well as conservative substitutions into the helical interface. Furthermore, we generated deletion mutants lacking the H-helix, the kink, and the entire C terminus. When transfected into neural and nonneural cell lines, steady-state levels of G-helix breaking and kink deletion mutants were dramatically lower than wild-type DJ-1. The effects of H-helix breakers were comparably smaller, and the non-helix breaking mutants only slightly destabilized DJ-1. The decreased steady-state levels were due to accelerated protein degradation involving in part the proteasome. G-helix breaking DJ-1 mutations abolished dimer formation. These structural perturbations had functional consequences on the cytoprotective activities of DJ-1. The destabilizing mutations conferred reduced cytoprotection against H(2)O(2) in transiently retransfected DJ-1 knock-out mouse embryonic fibroblasts. The loss of survival promoting activity of the DJ-1 mutants with destabilizing C-terminal mutations correlated with impaired anti-apoptotic signaling. We found that wild-type, but not mutant DJ-1 facilitated the Akt pathway and simultaneously blocked the apoptosis signal-regulating kinase 1, with which DJ-1 interacted in a redox-dependent manner. Thus, the G-helix and kink are critical determinants of the C-terminal helix-kink-helix motif, which is absolutely required for stability and the regulation of survival-promoting redox signaling of the Parkinson disease-associated protein DJ-1.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.