Parkin occurs in a stable, non-covalent, approximately 110-kDa complex in brain.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Parkin genindeki mutasyonlar, 52-kDa E3 ubiquitin ligaz, kalıtsal Parkinson hastalığının (PD) önemli bir nedenidir. İn vitro çalışmalar çok sayıda parkin etkileşimli protein tanımlamıştır. Parkin'in monomer olarak mı yoksa in vivo'daki kararlı bir protein kompleksinin bir parçası olarak mı var olduğu belirsizdir. Burada, endojen parkin'in fare beyninden, kalpten ve iskelet kasından elde edilen yerli ekstraktlarda kararlı, kovalent olmayan, yaklaşık 110-kDa kompleksinde meydana geldiğini, monomerik parkin'in tespit edilemez olduğunu gösteriyoruz. Kısmi denatürasyon deneyleri, bu kompleksin en azından bir tetramer olduğunu göstermektedir. Rapor edilen parkin bağlayıcı ortaklar, parkin kompleksi ile yerli jeller üzerinde tespit edilebilir bir ilişki göstermez. COS1, SH-SY5Y veya CHO hücrelerinde aşırı ekspresyon üzerine parkin, ağırlıklı olarak bir monomer olarak birikir ve bu da karmaşık oluşum için gerekli olan etkileşimcilerin bu hücrelerdeki miktarları sınırlamada mevcut olduğunu düşündürür. Önemli olarak, PD bağlantılı parkin mutasyonları parkin kompleks oluşumunu önemli ölçüde bozar. Bu veriler, parkin oligomerlerinin in vivo'da kararlı, kovalent olmayan, heteromerik bir komplekse dönüştüğünü ve parkin'in henüz tanımlanamayan kararlı bağlanma ortaklarına sahip olabileceğini göstermektedir.

Özgün kaynak özetini okuyun

Mutations in the gene for parkin, a 52-kDa E3 ubiquitin ligase, are a major cause of hereditary Parkinson's disease (PD). In vitro studies have identified a large number of parkin-interacting proteins. Whether parkin exists as a monomer or as part of a stable protein complex in vivo is uncertain. Here we demonstrate that endogenous parkin occurs in a stable, non-covalent, approximately 110-kDa complex in native extracts from mouse brain, heart and skeletal muscle, while monomeric parkin is undetectable. Partial denaturation experiments indicate that this complex is at least a tetramer. Reported parkin-binding partners do not show detectable association with the parkin complex on native gels. Upon overexpression in COS1, SH-SY5Y or CHO cells, parkin accumulates predominantly as a monomer, suggesting that the interactors required for complex formation are available in limiting amounts in these cells. Importantly, PD-linked parkin mutations significantly impair parkin complex formation. These data demonstrate that parkin oligomerizes into a stable, non-covalent, heteromeric complex in vivo, and suggest that parkin may have as yet unidentified stable binding partners.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.