NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
İnsan GFAP ek varyantları GFAPDelta164 ve GFAPDeltaexon6 her ikisi de GFAP + 1 antikoru tarafından tespit edilebilen benzersiz bir çerçeve dışı karboksi-terminus ile bir GFAP protein izoformu ile sonuçlanır. Daha önce GFAP+1'in astrositlerde ve Alzheimer hastalığı beyinlerinde nöronların dejenere edilmesinde ifade edildiğini bildirdik. Bu çalışmada nöronal GFAP+1 ekspresyonunu daha fazla araştırmayı amaçladık ve GFAP+1 antikorunu afinite saflaştırarak işe başladık. Saflaştırılmış antikor, nöronal GFAP+1 sinyalinin kaybına neden oldu, ancak GFAPalpha'nın amino ve karboksi-terminuslarına yönelik diğer antikorlar, daha önce açıklandığı gibi, GFAP-immunopozitif nöronları hala ortaya çıkardı. Bir batı lekesinin derinlemesine analizi ve ardından kütle spektrometrisi ile, daha önce tespit edilen nöronal GFAP+1 ifadesinin, antikorun nörofilament-L (NF-L) ile çapraz reaktivitesinden kaynaklandığını keşfettik. Bu, çift etiketli floresan immünohistokimya ve batı lekelenmesi ile saflaştırılmamış GFAP+1 antikoru ve NF-L'ye karşı bir antikor ile doğrulandı. Verilerimiz, NF-L'nin Alzheimer beyinlerindeki bazı karışık yapılarda birikebileceğini gösteriyor. Daha da önemlisi, saflaştırılmış GFAP+1 antikoru, yetişkin insan beynindeki belirli bir astrosit alt türünü açıkça ortaya koydu. Bu büyük astrositler beyin boyunca, örneğin subventriküler bölge boyunca, hipokampusta, striatumda ve kontrollerin omuriliğinde, Alzheimer ve Parkinson hastalarında bulunur. Belirli bir GFAP-izoformunun varlığı, bu astrositlerin özel bir işlevini göstermektedir.
Özgün kaynak özetini okuyun
The human GFAP splice variants GFAPDelta164 and GFAPDeltaexon6 both result in a GFAP protein isoform with a unique out-of-frame carboxy-terminus that can be detected by the GFAP+1 antibody. We previously reported that GFAP+1 was expressed in astrocytes and in degenerating neurons in Alzheimer's disease brains. In this study we aimed at further investigating the neuronal GFAP+1 expression and we started by affinity purifying the GFAP+1 antibody. The purified antibody resulted in a loss of neuronal GFAP+1 signal, although other antibodies directed against the amino- and carboxy-terminus of GFAPalpha still revealed GFAP-immunopositive neurons, as described before. With an in-depth analysis of a western blot, followed by mass spectrometry we discovered that the previously detected neuronal GFAP+1 expression was due to cross-reactivity of the antibody with neurofilament-L (NF-L). This was confirmed by double-label fluorescent immunohistochemistry and western blotting with the unpurified GFAP+1 antibody and an antibody against NF-L. Our data imply that NF-L can accumulate in some tangle-like structures in Alzheimer brains. More importantly, the purified GFAP+1 antibody clearly revealed a specific subtype of astrocytes in the adult human brain. These large astrocytes are present throughout the brain, e.g., along the subventricular zone, in the hippocampus, in the striatum and in the spinal cord of controls, Alzheimer, and Parkinson patients. The presence of a specific GFAP-isoform suggests a specialized function of these astrocytes.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.