NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc0
Gen kodlamasında mutasyonlar Leucine açısından zengin tekrar kinaz 2 (LRRK2) kalıtsal Parkinson hastalığının (PD) en yaygın nedenidir. LRRK2, merkezi bir katalitik çekirdek ve bir dizi protein-protein etkileşim alanı içeren çok alanlı bir protein kinazdır. Hem biyolojinin hem de LRRK2'nin patolojisinin anlaşılmasında önemli bir adım, otantik fizyolojik substratlarının tanımlanmasıyla elde edilecekti. Bu çalışmada, LRRK'ler için yakın zamanda önerilen bir substrat olan 4E-BP'nin fosforilasyonunu (ökaryotik inisiyasyon faktörü 4E (eIF4E) bağlayıcı protein) inceledik. LRRK2'nin 4E-BP'yi in vitro olarak fosforile edebildiğini bulduk. PD ile ilişkili LRRK2-G2019S mutantı, vahşi tip proteinden yaklaşık 2 kat daha aktifti. Bununla birlikte, LRRK2 otofosforilasyon, 4E-BP'den LRRK2'ye molar fazlalığı koşullarında 4E-BP fosforilasyondan daha güçlüydü. Ayrıca diğer üç kinazı (STK3, MAPK14/p38alpha ve DAPK2) test ettik ve MAPK14/p38alpha'nın LRRK2 in vitro ile aynı bölgede 4E-BP'yi verimli bir şekilde fosforilatabildiğini bulduk. Son olarak, HEK hücre hatlarında LRRK2'nin indüklenebilir ekspresyonunu kullanarak 4E-BP fosforilasyon seviyelerinde değişiklikler görmedik. Ayrıca MAPK14/p38alpha fosforilatlarının 4E-BP'yi geçici aşırı ifade deneylerinde LRRK2'nin yapmadığını bulduk. Bazı sistemlerde bildirilen 4E-BP fosforilasyonunun artmasının, doğrudan LRRK2 aktivitesi yerine p38 aracılı hücre stresi ile ilişkili olabileceğini öne sürüyoruz. Genel olarak, sonuçlarımız 4E-BP'nin LRRK2 için nispeten zayıf bir doğrudan substrat olduğunu göstermektedir.
Özgün kaynak özetini okuyun
Mutations in the gene encoding Leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) are the most common cause of inherited Parkinson's disease (PD). LRRK2 is a multi-domain protein kinase containing a central catalytic core and a number of protein-protein interaction domains. An important step forward in the understanding of both the biology and the pathology of LRRK2 would be achieved by identification of its authentic physiological substrates. In the present study we examined phosphorylation of 4E-BP (eukaryotic initiation factor 4E (eIF4E)-binding protein), a recently proposed substrate for LRRKs. We found that LRRK2 is capable of phosphorylating 4E-BP in vitro. The PD related LRRK2-G2019S mutant was approximately 2 fold more active than wild type protein. However, LRRK2 autophosphorylation was stronger than 4E-BP phosphorylation under conditions of molar excess of 4E-BP to LRRK2. We also tested three other kinases (STK3, MAPK14/p38alpha and DAPK2) and found that MAPK14/p38alpha could efficiently phosphorylate 4E-BP at the same site as LRRK2 in vitro. Finally, we did not see changes in 4E-BP phosphorylation levels using inducible expression of LRRK2 in HEK cell lines. We also found that MAPK14/p38alpha phosphorylates 4E-BP in transient overexpression experiments whereas LRRK2 did not. We suggest that increased 4E-BP phosphorylation reported in some systems may be related to p38-mediated cell stress rather than direct LRRK2 activity. Overall, our results suggest that 4E-BP is a relatively poor direct substrate for LRRK2.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.