NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
BackgroundAlpha synüklein (alfa-Syn), Parkinson hastalığı gibi birkaç nörodejeneratif hastalıkla ilişkili Lewy cisimlerinin ana bileşenidir. Alfa-Syn misfold ve agregasyon ile sonuçlanan D-glukoz ile glikasyon incelenirken, D-riboz ile alfa-Syn üzerindeki glikasyonun etkileri araştırılmamıştır.Metodoloji/ilkel bulgularBurada, ribosilasyonun alfa-Syn misfoldingini indüklediğini ve yüksek proteinli globul içeren gelişmiş glikasyon son ürünleri (AGE) ürettiğini gösteriyoruz. Yerli ve SDS-PAGE'den elde edilen sonuçlar, D-ribozun alfa-Syn ile hızlı bir şekilde tepki verdiğini ve dimerizasyon ve polimerizasyona yol açtığını gösterdi. Trypsin sindirim ve dizileme analizi, ribosilasyon sırasında lisinil kalıntılarının (K(58), K(60), K(80), K(96), K(97) ve K(102)'nin N-terminal bölgedekilerden daha hızlı D-riboz ile reaksiyona girdiğini ortaya koymuştur. Batı lekelemesi kullanılarak, alfa-Syn'in glikasyonundan kaynaklanan AGE'ler D-riboz varlığında 24 saat içinde gözlendi, ancak D-glukoz varlığında gözlenmedi. 410 nm'de floresanstaki değişiklikler, erken ribosilasyon sırasında AGE'lerin oluştuğunu tekrar gösterdi. Ribosile alfa-Syn'in ikincil yapısındaki değişiklikler, protein konformasyonu üzerine yapılan çalışmalarda CD spektrometrisi tarafından açıkça tespit edilememiştir. Bununla birlikte, 310 nm'deki içsel floresan, D-riboz varlığında belirgin bir şekilde azaldı. Atomik kuvvet mikroskobu ile yapılan gözlemler, glikal alfa-Syn'in yüzey morfolojisinin küresel agregalara benzediğini gösterdi. tioflavin T (ThT) floresan, ribosilasyondan bağımsız olarak alfa-Syn kuluçka sırasında artmıştır. Kuluçka süresi arttıkça, alfa-Syn'in ribosilasyonu, ANS'ın floresanında mavi kayma (yaklaşık 100 nm) ile sonuçlandı. Ribosile alfa-Syn'in ışık saçılması yoğunluğu, yerli alfa-Syn'den belirgin bir şekilde farklı değildi, ribosile alfa-Syn'in erimiş protein globülleri olarak mevcut olduğunu düşündürmektedir. Ribosilated ürünler, SH-SY5Y hücrelerine yüksek sitotoksisiteye sahipti, bu da LDH salınımına ve reaktif oksijen türlerinin (ROS) seviyelerinde artışa yol açtı. Konvansiyonlar / anlamlı-alfa-Syn, hücre oksidatif strese neden olan ve yüksek sitotoksisiteye neden olan D-riboz üreten erimiş globule benzeri agregasyonların varlığında hızla glise edilir.
Özgün kaynak özetini okuyun
BackgroundAlpha synuclein (alpha-Syn) is the main component of Lewy bodies which are associated with several neurodegenerative diseases such as Parkinson's disease. While the glycation with D-glucose that results in alpha-Syn misfold and aggregation has been studied, the effects of glycation with D-ribose on alpha-Syn have not been investigated.Methodology/principal findingsHere, we show that ribosylation induces alpha-Syn misfolding and generates advanced glycation end products (AGEs) which form protein molten globules with high cytotoxcity. Results from native- and SDS-PAGE showed that D-ribose reacted rapidly with alpha-Syn, leading to dimerization and polymerization. Trypsin digestion and sequencing analysis revealed that during ribosylation the lysinyl residues (K(58), K(60), K(80), K(96), K(97) and K(102)) in the C-terminal region reacted more quickly with D-ribose than those of the N-terminal region. Using Western blotting, AGEs resulting from the glycation of alpha-Syn were observed within 24 h in the presence of D-ribose, but were not observed in the presence of D-glucose. Changes in fluorescence at 410 nm demonstrated again that AGEs were formed during early ribosylation. Changes in the secondary structure of ribosylated alpha-Syn were not clearly detected by CD spectrometry in studies on protein conformation. However, intrinsic fluorescence at 310 nm decreased markedly in the presence of D-ribose. Observations with atomic force microscopy showed that the surface morphology of glycated alpha-Syn looked like globular aggregates. thioflavin T (ThT) fluorescence increased during alpha-Syn incubation regardless of ribosylation. As incubation time increased, ribosylation of alpha-Syn resulted in a blue-shift (approximately 100 nm) in the fluorescence of ANS. The light scattering intensity of ribosylated alpha-Syn was not markedly different from native alpha-Syn, suggesting that ribosylated alpha-Syn is present as molten protein globules. Ribosylated products had a high cytotoxicity to SH-SY5Y cells, leading to LDH release and increase in the levels of reactive oxygen species (ROS).Conclusions/significancealpha-Syn is rapidly glycated in the presence of D-ribose generating molten globule-like aggregations which cause cell oxidative stress and result in high cytotoxicity.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.