NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
İnsan dopamin D(2long) ve D(3) reseptörleri, O(6)-alkilguanin-DNA-alkiltransferaz artı bir peptid epitopu etiketinin N-terminal ilavesi ile değiştirildi. Bu dört yapının her birini yalnızca bir antibiyotik eklendiğinde ifade edebilen hücreler kuruldu ve ifadenin düzenlenmiş ve indüklenebilir kontrolünü, SNAP ve CLIP etiketi kovalent etiketleme reaktiflerinin özgüllüğünü doğrulamak için kullanıldı ve homojen zaman çözünmüş floresan rezonans enerji aktarımına, hücre yüzeyinin D(2long) ve D(3) reseptör homomerlerinin varlığına dayanıyordu. Potansiyel olarak hücre yüzeyi D(2long)-D(3) heteromerlerinin varlığını oluşturma ve raporlama yeteneğine sahip olan karşılıklı yapıların kurucu ifadesinin ardından, bireysel klonlar, kurucu olarak ifade edilen protomerin ifade seviyeleri için değerlendirildi. Bu, partner protomerin indüksiyonundan etkilenmedi ve tespit edilebilir hücre yüzeyi D(2long)-D(3) heteromerleri üretmek için gerekli olan ortağın ekspresyon seviyesi tanımlandı. Bu tür homomerlerin ve heteromerlerin birlikte var olduğu ve hem homomerler hem de D(2long) heteromerleri ve D(3) reseptörlerinin işlev yaklaşımının yeniden yapılanması kullanılarak, potansiyel olarak ilişkili G proteininin trans-aktivasyonu yoluyla işlevsel olduğu gösterilmiştir. Bu çalışmalar dopamin D(2long) ve D(3) reseptörlerinin hem homomerleri hem de heteromerleri oluşturma yeteneğini gösterir ve hücrelerde her bir alt tipi ifade eden hücrelerde homomerlerin ve heteromerlerin sabit durumdaki karmaşık bir karışımını gösterir. Bu veriler hem D(2long) hem de D(3) reseptörlerinin şizofreni ve Parkinson hastalığı gibi dahil olduğu bozukluklar için hem de bu siteler aracılığıyla eylemlerini uygulayan ilaçlar için potansiyel öneme sahiptir.
Özgün kaynak özetini okuyun
Human dopamine D(2long) and D(3) receptors were modified by N-terminal addition of SNAP or CLIP forms of O(6)-alkylguanine-DNA-alkyltransferase plus a peptide epitope tag. Cells able to express each of these four constructs only upon addition of an antibiotic were established and used to confirm regulated and inducible control of expression, the specificity of SNAP and CLIP tag covalent labeling reagents, and based on homogenous time-resolved fluorescence resonance energy transfer, the presence of cell surface D(2long) and D(3) receptor homomers. Following constitutive expression of reciprocal constructs, potentially capable of forming and reporting the presence of cell surface D(2long)-D(3) heteromers, individual clones were assessed for levels of expression of the constitutively expressed protomer. This was unaffected by induction of the partner protomer and the level of expression of the partner required to generate detectable cell surface D(2long)-D(3) heteromers was defined. Such homomers and heteromers were found to co-exist and using a reconstitution of function approach both homomers and heteromers of D(2long) and D(3) receptors were shown to be functional, potentially via trans-activation of associated G protein. These studies demonstrate the ability of dopamine D(2long) and D(3) receptors to form both homomers and heteromers, and show that in cells expressing each subtype a complex mixture of homomers and heteromers co-exists at steady state. These data are of potential importance both to disorders in which D(2long) and D(3) receptors are implicated, like schizophrenia and Parkinson disease, and also to drugs exerting their actions via these sites.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.