Destabilizing domains mediate reversible transgene expression in the brain.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Oral ilaçlar vererek in vivo transgene ifadesinin düzenlenmesi gen terapisi alanı için uzun zamandır hedef olmuştur. Yakın zamanda hedeflenen proteazmal bozulmaya dayanan yeni bir gen düzenleme sistemi geliştirilmiştir. Sistem, kaynaşmış proteinleri proteazom yıkımına yönlendiren Escherichia coli dihidrofolate redüktazın (DHFR) bir istikrarsızlaştırıcı etki alanına (DD) dayanmaktadır. YFP proteinlerinin destabilize etki alanlarına kaynaşması, beyinde YFP ekspresyonunun TMP tabanlı indüksiyonunu sağlarken, TMP'nin atlanması YFP ekspresyonunun kaybına neden oldu. Dahası, YFP ekspresyonunun indüksiyonu doza bağımlıydı ve daha yüksek TMP dozajlarında, indüklenen YFP, düzenlenmemiş transgene ekspresyonu ile karşılaştırılabilir seviyelere ulaştı., Transgene ekspresyonu DD sistemi kullanılarak geri dönüşümlü olarak düzenlenebilir. Önemli olarak, TMP tedavisinin veya DD-füzyon proteinlerinin beyindeki ekspresyonunun hiçbir olumsuz etkisi gözlenmemiştir. DHFR'den türetilen denge bozucu alanların biyolojik olarak aktif bir molekülle kullanılabileceğinin kanıtını göstermek için, DD, dopamin nöronlarının güçlü bir nörotrofik faktörü olan GDNF'ye kaynaştı. DD'nin N-terminal yerleşimi, biyolojik olarak aktif GDNF'nin TMP ile düzenlenmiş salınımıyla sonuçlandı. Bulgularımız, TMP ile düzenlenmiş destabilize alanların beyinde transgen düzenlemesini karşılayabileceğini göstermektedir. GDNF'nin düzenlenebilmesi, gelecekteki gen terapileri (örneğin Parkinson hastalığı için) geliştirmek için çok umut vericidir ve daha fazla araştırılmalıdır.

Özgün kaynak özetini okuyun

Regulating transgene expression in vivo by delivering oral drugs has been a long-time goal for the gene therapy field. A novel gene regulating system based on targeted proteasomal degradation has been recently developed. The system is based on a destabilizing domain (DD) of the Escherichia coli dihydrofolate reductase (DHFR) that directs fused proteins to proteasomal destruction. Creating YFP proteins fused to destabilizing domains enabled TMP based induction of YFP expression in the brain, whereas omission of TMP resulted in loss of YFP expression. Moreover, induction of YFP expression was dose dependent and at higher TMP dosages, induced YFP reached levels comparable to expression of unregulated transgene., Transgene expression could be reversibly regulated using the DD system. Importantly, no adverse effects of TMP treatment or expression of DD-fusion proteins in the brain were observed. To show proof of concept that destabilizing domains derived from DHFR could be used with a biologically active molecule, DD were fused to GDNF, which is a potent neurotrophic factor of dopamine neurons. N-terminal placement of the DD resulted in TMP-regulated release of biologically active GDNF. Our findings suggest that TMP-regulated destabilizing domains can afford transgene regulation in the brain. The fact that GDNF could be regulated is very promising for developing future gene therapies (e.g. for Parkinson's disease) and should be further investigated.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.