Monomer DJ-1 and its N-terminal sequence are necessary for mitochondrial localization of DJ-1 mutants.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

DJ-1, bir roman onkogenidir ve aynı zamanda ailesel Parkinson hastalığı için nedensel bir gendir (park7). DJ-1, transkripsiyonel düzenleme, anti-oksidatif reaksiyon ve şaperon ve mitokondriyal düzenlemeyi içeren birden fazla işleve sahiptir. Mitokondriyal fonksiyon bozukluğu DJ-1-knockout farelerde ve kızartmada gözlenir ve mitokondriyal DJ-1 oksidatif stres kaynaklı hücre ölümüne karşı daha koruyucudur. DJ-1'in mitokondriye translokasyonu, DJ-1'in sistein 106'sının (C106) oksidasyonuna yol açan oksidatif stresle artırılsa da, mitokondriyal DJ-1'in özellikleri ve DJ-1'in mitokondriye translokasyonunun mekanizması zayıf bir şekilde anlaşılmaktadır. Bu çalışmada, immünostaining, ko-immunopresipitasyon, hücre fraksiyonu ve çekme-aşağı deneyler glutamin 18 (E18) DJ-1 mutantlarının mitokondride lokalize olduğunu ve homodimer yapmadığını göstermiştir. Aynı şekilde, dimer arayüzünde bulunan iki sistein mutasyonu olan DJ-1, C46S ve C53A ve patojenik mutantlar, M26I ve L166P DJ-1, mitokondride lokalize olduğu ve homodimer yapmadığı bulundu. Mutant DJ-1, C106'nın oksitlenmediği E18A ve C106S'yi barındırmaktadır, aynı zamanda mitokondride de lokalize edilmiştir, bu da C106'nın oksidasyonunun DJ-1'in mitokondriyal lokalizasyonu için önemli ancak gerekli olmadığını göstermektedir. E18A DJ-1'in mitokondrideki oksidatif fosforilasyon sisteminin bir çiftleştiricisi olan CCCP ile hücrelerin tedavisi ile mitokondrial membran potansiyeli azaltıldığında mitokondriden sitoplazmaya translokasyona uğradığı belirtilmelidir. Ayrıca, DJ-1'deki N-terminal 12 amino asidin silinmesi veya değiştirilmesi, mitokondriden sitoplazmaya E18A, M26I ve L166P DJ-1'in yeniden lokalizasyonuyla sonuçlandı. Bu bulgular, bir monomer ve N-terminal 12 amino asitlerinin DJ-1 mutantlarının mitokondriyal lokalizasyonu için gerekli olduğunu ve C106 oksidasyonu veya E18 mutasyonu ile indüklenen konformasyon değişikliğinin DJ-1'in mitokondriye translokasyonuna yol açtığını göstermektedir.

Özgün kaynak özetini okuyun

DJ-1 is a novel oncogene and also a causative gene for familial Parkinson's disease (park7). DJ-1 has multiple functions that include transcriptional regulation, anti-oxidative reaction and chaperone and mitochondrial regulation. Mitochondrial dysfunction is observed in DJ-1-knockout mice and fry, and mitochondrial DJ-1 is more protective against oxidative stress-induced cell death. Although translocation of DJ-1 into mitochondria is enhanced by oxidative stress that leads to oxidation of cysteine 106 (C106) of DJ-1, the characteristics of mitochondrial DJ-1 and the mechanism by which DJ-1 is translocated into mitochondria are poorly understood. In this study, immunostaining, co-immunoprecipitation, cell fractionation and pull-down experiments showed that mutants of glutamine 18 (E18) DJ-1 are localized in mitochondria and do not make homodimers. Likewise, DJ-1 with mutations of two cysteines located in the dimer interface, C46S and C53A, and pathogenic mutants, M26I and L166P DJ-1, were found to be localized in mitochondria and not to make homodimers. Mutant DJ-1 harboring both E18A and C106S, in which C106 is not oxidized, was also localized in mitochondria, indicating that oxidation of C106 is important but not essential for mitochondrial localization of DJ-1. It should be noted that E18A DJ-1 was translocated from mitochondria to the cytoplasm when mitochondrial membrane potential was reduced by treatment of cells with CCCP, an uncoupler of the oxidative phosphorylation system in mitochondria. Furthermore, deletion or substitution of the N-terminal 12 amino acids in DJ-1 resulted in re-localization of E18A, M26I and L166P DJ-1 from mitochondria into the cytoplasm. These findings suggest that a monomer and the N-terminal 12 amino acids are necessary for mitochondrial localization of DJ-1 mutants and that conformation change induced by C106 oxidation or by E18 mutation leads to translocation of DJ-1 into mitochondria.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.