NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Leucine-Rich Repeat protein kinaz 2 (LRRK2) genindeki Missense mutasyonları Parkinson hastalığı (PD) (Farrer ve ark., 2005; Skipper ve ark., 2005; Di Fonzo ve ark., 2006; Healy ve ark., 2008; Paisan-Ruiz ve ark., 2008; Lesage et al., 2010) geliştirmek için en yaygın genetik yatkınlıktır. LRRK2, aktivitesi nöronal toksisite ile ilgili olan bir GTPaz etki alanı ve bir serin / treonin protein kinaz etki alanına sahip büyük bir çok alanlı fosfoproteindir; ancak kesin mekanizma bilinmemektedir. LRRK2 otofosforilatlar enzim boyunca birkaç serin/treonin kalıntısı üzerinde bulunur ve yukarı doğru kinazlar tarafından düzenlenmesi önerilen Ser910, Ser935, Ser955 ve Ser973 üzerinde yapısal olarak fosforile edilir. Burada hastalıkla ilişkili mutasyonların Arg1441Cys, Arg1441Gly, Ala1442Pro, Tyr1699Cys, Ile2012Thr, Gly2019Ser ve Ile2020Thr etkilerini analiz ederek bu bölgelerde fosforegülasyonu araştırıyoruz. Ayrıca fosfozit serinin 910, 935, 955 ve 973'ün alanin ikameleri ve LRRK2'nin otofosforilasyonunda spesifik LRRK2 inhibisyonu üzerinde çalıştık Ser1292, Thr1491, Thr2483 ve fosforilasyon hücresel sitelerde. Arg1441Cys, Arg1441His, Ala1442Pro ve Tyr1699Cys dahil olmak üzere Roc-COR etki alanlarındaki mutantların LRRK2 kinaz aktivitesini olumlu bir şekilde artırabildiğini, aynı zamanda hücresel sitelerin defosforilasyonunu teşvik ettiğini bulduk. Hücresel bölgelerin mutasyonu bireysel olarak LRRK2 intrinsik kinaz aktivitesini etkilemedi; Bununla birlikte, Ser910/935/955/973Ala mutasyonları LRRK2'nin artmış kinaz aktivitesine doğru eğilim gösterdi. Artan cAMP seviyeleri, LRRK2 hücresel site fosforilasyon, 14-3-3 bağlanma veya kinaz aktivitesinin artmasına yol açmadı. Hücrelerde, LRRK2 kinaz aktivitesinin inhibisyonu, Calyculin A ve Okadaik asit duyarlı fosfatazlar tarafından Ser1292'nin defosforilasyonuna yol açarken, hücresel bölgeler Calyculin A duyarlı fosfatazlar tarafından defosforilasyona uğrar. Bu bulgular, hem Ser1292 hem de Ser910/935/955/973 fosforilasyon bölgelerinin karşılaştırmalı analizinin, LRRK2 kinaz ve biyolojik aktivitenin in vitro ve in vivo olarak önemli ve farklı önlemler sağlayacağını göstermektedir.
Özgün kaynak özetini okuyun
Missense mutations in the Leucine-Rich Repeat protein Kinase 2 (LRRK2) gene are the most common genetic predisposition to develop Parkinson's disease (PD) (Farrer et al., 2005; Skipper et al., 2005; Di Fonzo et al., 2006; Healy et al., 2008; Paisan-Ruiz et al., 2008; Lesage et al., 2010). LRRK2 is a large multi-domain phosphoprotein with a GTPase domain and a serine/threonine protein kinase domain whose activity is implicated in neuronal toxicity; however the precise mechanism is unknown. LRRK2 autophosphorylates on several serine/threonine residues across the enzyme and is found constitutively phosphorylated on Ser910, Ser935, Ser955, and Ser973, which are proposed to be regulated by upstream kinases. Here we investigate the phosphoregulation at these sites by analyzing the effects of disease-associated mutations Arg1441Cys, Arg1441Gly, Ala1442Pro, Tyr1699Cys, Ile2012Thr, Gly2019Ser, and Ile2020Thr. We also studied alanine substitutions of phosphosite serines 910, 935, 955, and 973 and specific LRRK2 inhibition on autophosphorylation of LRRK2 Ser1292, Thr1491, Thr2483 and phosphorylation at the cellular sites. We found that mutants in the Roc-COR domains, including Arg1441Cys, Arg1441His, Ala1442Pro, and Tyr1699Cys, can positively enhance LRRK2 kinase activity, while concomitantly inducing the dephosphorylation of the cellular sites. Mutation of the cellular sites individually did not affect LRRK2 intrinsic kinase activity; however, Ser910/935/955/973Ala mutations trended toward increased kinase activity of LRRK2. Increased cAMP levels did not lead to increased LRRK2 cellular site phosphorylation, 14-3-3 binding or kinase activity. In cells, inhibition of LRRK2 kinase activity leads to dephosphorylation of Ser1292 by Calyculin A and Okadaic acid sensitive phosphatases, while the cellular sites are dephosphorylated by Calyculin A sensitive phosphatases. These findings indicate that comparative analysis of both Ser1292 and Ser910/935/955/973 phosphorylation sites will provide important and distinct measures of LRRK2 kinase and biological activity in vitro and in vivo.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.