Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Arka planİnsan kemik iliğinin farklılaşmasının farklı indükleyicilerle birlikte Mesenkimal Kök Hücreler (hBM MSC) dopaminerjik nöronlara farklılaşmasının etkinliğinin değiştiği bulunmuştur. Bu nedenle, mevcut çalışmada hBM MSC'nin bazı nöronal indükleyicilere ve bunların kombinasyonlarına verdiği tepkiyi araştırdık. Nöronal farklılaşma indükleyici ajanlar Fibroblastik Büyüme Faktörü 2 (FGF2), Sonic Hedge Hog (Shh), Fibroblastik Büyüme Faktörü 8 (FGF8) ve Tüm Trans retinoik Asit (ATRA) tek başına veya çeşitli kombinasyonlarda kullanıldı.SonuçlarFarklı ve farklılaşmamış hBM MSC, morfoloji, transkripsiyonel ve translasyonel düzeylerinde hücre belirteçlerinin ekspresyonu ile karakterize edildi. İndüklenmiş hBM MSC, morfoloji gibi nöronları ortaya çıkardı ve tüm indükleyici ajanlarla nöronal farklılaşmayı öneren hücresel belirteçleri ifade etti. Bununla birlikte, qPCR yoluyla nicel analizler yapıldıktan sonra, FGF2 ile indüklenen hücrelerin tirozin hidroksilazın (TH) maksimum ifadesini 47.5 kat olarak gösterdiği bulunmuştur. Farklılaşmış ve farklılaşmamış hücrelerin immünofluoresans analizi, farklılaşmış hücrelerde, çeviri düzeyinde, nevrofilament, mikrotübül ilişkili protein- 2, beta tubulin III ve TH ifadesini de ortaya çıkardı. Bu veriler immünobloting analizi ile desteklenmiştir. Ayrıca, ELISA çalışması FGF2 ile indüklenen kültürler tarafından dopamin salınımını da destekledi. Hücreler KCl solüsyonu ile depolarize edildiğinde, Shh & FGF8 ile indüklenenler maksimum kalsiyum iyon kaçakçılığı gösterdi, ardından sadece FGF2 ile indüklenen hücreler.SonuçlarHBM MSC'nin, FGF2 gibi sadece bir ana indükleyici içeren çok basit bir medya kokteyli varlığında dopaminerjik nöronlara verimli bir şekilde ayırt etmek için koaksifiye edilebileceği ve böylece Parkinson ve diğer ilgili bozukluklarda hücresel tedaviye katkıda bulunabileceği sonucuna varıyoruz. Bu dopaminerjik nöronlar, kalsiyum iyon kaçakçılığı tarafından gösterildiği gibi işlevsel olarak da aktiftir.
Özgün kaynak özetini okuyun
BackgroundThe reported efficiency of differentiation of human bone marrow derived Mesenchymal Stem Cells (hBM MSC) into dopaminergic neurons with different inducers is found to vary. Thus, in the current study we have investigated the response of hBM MSC to some of the neuronal inducers and their combinations. Neuronal differentiation inducing agents Fibroblastic Growth Factor 2 (FGF2), Sonic Hedge Hog (Shh), Fibroblastic Growth Factor 8 (FGF8) & All Trans Retinoic Acid (ATRA) were used either singly or in varied combinations.ResultsThe differentiated and undifferentiated hBM MSC were characterized in terms of morphology, expression of cell markers at transcriptional and translational levels, amount of dopamine secreted by the cells in the media and changes in cell membrane potential by calcium ions imaging. Induced hBM MSC revealed neuron like morphology and expressed cellular markers suggesting neuronal differentiation with all the inducing agents. However, upon quantitative analysis through qPCR, cells induced with FGF2 were found to show maximum expression of tyrosine hydroxylase (TH) by 47.5 folds. Immunofluorescence analysis of differentiated and undifferentiated cells also revealed expression of nestin, neurofilament, microtubule associated protein- 2, beta tubulin III and TH in differentiated cells, at translational level. This data was supported by immunoblotting analysis. Further, ELISA study also supported the release of dopamine by cultures induced with FGF2. When the cells were depolarised with KCl solution, those induced with Shh & FGF8 showed maximum calcium ion trafficking, followed by the cells induced with FGF2 only.ConclusionsWe conclude that hBM MSC can be coaxed to differentiate efficiently into dopaminergic neurons in the presence of a very simple media cocktail containing only one main inducer like FGF2 and thus contribute towards cellular therapy in Parkinson's and other related disorders. These dopaminergic neurons are also functionally active, as shown by calcium ion trafficking.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.