NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
BackgroundLeucine-rich repeat kinaz 2 (LRRK2), bir mutasyonun Parkinson hastalığına (PD) neden olduğu bir gendir ve p53 bir prototip tümör baskılayıcıdır. Ek olarak, PD'li hastalarda p53'ün aktivasyonu birkaç çalışma ile bildirilmiştir. p53 fosforilasyon aktivitesini düzenlemek için kritik olduğundan ve LRRK2 kinaz olduğundan, p53'ün LRRK2 tarafından fosforile edilip edilmediğini test ettik.ResultsLRRK2 in vitro kinaz tahlilinde TXR bölgelerinde fosforilatlar treonin (Thr) ve T304 ve T377 putatif fosforilat kalıntıları olarak tanımlanmıştır. P53 TXR motifinde fosfo-Thr artışı, G2019S'yi aşırı ifade eden hücrelerde ve bir G2019S taşıyıcısının insan kaynaklı pluripotent kök (iPS) hücrelerinde doğrulandı. LRRK2 ve p53 arasındaki etkileşimler, farklılaşmış SH-SY5Y hücrelerinin lizatlarının ko-immunopresipitasyonu ile doğrulandı. LRRK2 aracılı p53 fosforilasyon, p53'ü ağırlıklı olarak çekirdeğe translokalize eder ve SH-SY5Y hücrelerinde p21 (WAF1/CIP1) ifadesini ters transkripsiyon-polimeraz zincir reaksiyonuna ve Western blot tahlil sonuçlarına dayanarak arttırır. p21(WAF1/CIP1) promoter-reporter kullanan luciferaz tahlili de LRRK2 kinaz aktivitesinin p21 ifadesini artırdığını doğruladı. G2019S ve fosfomimetik p53 T304/377D mutantların eksojen ekspresyonu, p21(WAF1/CIP1) ve parçalanmış PARP'ın ekspresyonunu ve aynı hücrelerdeki sitotoksisiteyi arttırdı. Ayrıca, p53 T304/377D mutantlarının geçici ekspresyonundan sonra sıçan birincil nöron hücrelerinde p21 ekspresyonunun arttığını ve G2019S transgenik farelerinin orta beyin lizatlarını gözlemledik.Conclusionp53 bir LRRK2 kinaz substratıdır. P53'ün LRRK2 ile fosforilasyonu, farklılaşmış SH-SY5Y hücrelerinde ve sıçan birincil nöronlarında p21 (WAF1/CIP1) ekspresyonunu ve apoptozu indükler.
Özgün kaynak özetini okuyun
BackgroundLeucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) is a gene in which a mutation causes Parkinson's disease (PD), and p53 is a prototype tumor suppressor. In addition, activation of p53 in patient with PD has been reported by several studies. Because phosphorylation of p53 is critical for regulating its activity and LRRK2 is a kinase, we tested whether p53 is phosphorylated by LRRK2.ResultsLRRK2 phosphorylates threonine (Thr) at TXR sites in an in vitro kinase assay, and the T304 and T377 were identified as putative phosphorylated residues. An increase of phospho-Thr in the p53 TXR motif was confirmed in the cells overexpressing G2019S, and human induced pluripotent stem (iPS) cells of a G2019S carrier. Interactions between LRRK2 and p53 were confirmed by co-immunoprecipitation of lysates of differentiated SH-SY5Y cells. LRRK2 mediated p53 phosphorylation translocalizes p53 predominantly to nucleus and increases p21(WAF1/CIP1) expression in SH-SY5Y cells based on reverse transcription-polymerase chain reaction and Western blot assay results. The luciferase assay using the p21(WAF1/CIP1) promoter-reporter also confirmed that LRRK2 kinase activity increases p21 expression. Exogenous expression of G2019S and the phosphomimetic p53 T304/377D mutants increased expression of p21(WAF1/CIP1) and cleaved PARP, and cytotoxicity in the same cells. We also observed increase of p21 expression in rat primary neuron cells after transient expression of p53 T304/377D mutants and the mid-brain lysates of the G2019S transgenic mice.Conclusionp53 is a LRRK2 kinase substrate. Phosphorylation of p53 by LRRK2 induces p21(WAF1/CIP1) expression and apoptosis in differentiated SH-SY5Y cells and rat primary neurons.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.