Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Nöronal yaralanma ve nörodejenerasyon, epilepsi, inme, travmatik beyin hasarı, Parkinson hastalığı ve Alzheimer hastalığı gibi çeşitli nörolojik koşullardaki ayırıcı patolojilerdir. Çeşitli beyin bölgelerinde mutlak nöron ve interneuron sayımlarının nicelenmesi, hayvan modellerinde nörolojik hakaretlerin veya nörodejeneratif hastalık ilerlemesinin etkisini anlamak için gereklidir. Bununla birlikte, geleneksel nitel puanlama tabanlı protokoller, nöroproteksiyon değerlendirme çalışmalarında kullanılmak üzere yüzeysel ve daha az güvenilirdir. Burada, nöronal yaralanma ve nörodejenerasyonun tarafsız nöron ve internöron sayımı ile nicelenmesi için optimize edilmiş bir stereoloji protokolünü tanımlıyoruz. 20 bölümden oluşan her bir serideki her 20. bölüm NeuN(+) toplam nöron ve parvalbumin(+) internöron immünostaining için işlenmiştir. Hipokampusu içeren bölümler daha sonra güvenilir bir şekilde önceden tanımlanmış beş alt bölgeye ayrılmıştır. Her bölge, stereoloji yazılımı tarafından yönlendirilen bir mikroskopla ayrı ayrı analiz edildi. Bölgesel doku hacmi Cavalieri tahmincisi kullanılarak, hücre yoğunluğu ve hücre sayısı optik disektör ve optik kesirleyici kullanılarak belirlendi. Bu protokol, sıçan hipokampüsü içinde 1.5 milyon toplam nöron ve 0.05 milyon PV(+) internöron tahmini verdi. Protokol, 2D görüntülerden ziyade 3D özelliklere dayandığı için mutlak sayımlar için daha fazla tahmin gücüne sahiptir. Toplam nöron sayımı, stereoloji sistemimizden daha pahalı olan sofistike sistemlerden gelen edebiyat değerleriyle tutarlıydı. Bu tarafsız stereoloji protokolü, herhangi bir beyin bölgesindeki toplam nöronların hassas, orta düzeyde sayımına izin verir ve böylece çeşitli akut beyin hasarı ve kronik nörolojik modellerde nöronal yaralanma ve nörodejenerasyon çalışmaları için nicel bir araç sağlar.
Özgün kaynak özetini okuyun
Neuronal injury and neurodegeneration are the hallmark pathologies in a variety of neurological conditions such as epilepsy, stroke, traumatic brain injury, Parkinson's disease and Alzheimer's disease. Quantification of absolute neuron and interneuron counts in various brain regions is essential to understand the impact of neurological insults or neurodegenerative disease progression in animal models. However, conventional qualitative scoring-based protocols are superficial and less reliable for use in studies of neuroprotection evaluations. Here, we describe an optimized stereology protocol for quantification of neuronal injury and neurodegeneration by unbiased counting of neurons and interneurons. Every 20th section in each series of 20 sections was processed for NeuN(+) total neuron and parvalbumin(+) interneuron immunostaining. The sections that contain the hippocampus were then delineated into five reliably predefined subregions. Each region was separately analyzed with a microscope driven by the stereology software. Regional tissue volume was determined by using the Cavalieri estimator, as well as cell density and cell number were determined by using the optical disector and optical fractionator. This protocol yielded an estimate of 1.5 million total neurons and 0.05 million PV(+) interneurons within the rat hippocampus. The protocol has greater predictive power for absolute counts as it is based on 3D features rather than 2D images. The total neuron counts were consistent with literature values from sophisticated systems, which are more expensive than our stereology system. This unbiased stereology protocol allows for sensitive, medium-throughput counting of total neurons in any brain region, and thus provides a quantitative tool for studies of neuronal injury and neurodegeneration in a variety of acute brain injury and chronic neurological models.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.