NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Sıçan, nörolojik çalışmalar için fare üzerinde tercih edilen bir model sistemidir ve sıçandaki hücre tipine özgü Cre ifadesi, nörodejeneratif hastalık modellemesi ve optogenetik için özellikle değerli olan ilgi nöronlarındaki gen fonksiyonunun kesin ablasyonunu sağlar. Ancak, bu tür Cre sıçanları çok azdır. Burada iki Cre sıçanının karakterizasyonunu, tirozin hidroksilaz (TH)-Cre ve dopamin aktif taşıyıcısının (DAT veya Slc6a3)-Cre, immünohistokimya (IHC) ve mRNA floresan situ hibridizasyonunun (FISH) bir kombinasyonunu kullanarak Cre aktivitesi için floresan bir muhabir olarak rapor ediyoruz. Her iki Cre çizgisinde de beklenen nöronlarda Cre ekspresyonunu tespit ettik. İlginç bir şekilde, Th-Cre sıçanlarında, ancak DAT-Cre sıçanlarında Cre'nin dişi germ hücrelerinde ifade edildiğini, bu da diş ipli alelin germline eksizyonuna ve dolayısıyla tüm vücut nakavt sıçanlarının nesline izin verdiğini bulduk. Özetle, verilerimiz Cre kasetinin hedeflenen entegrasyonunun endojen promotörün ekspresyon paterninin sadık bir şekilde yeniden kapsüllenmesine yol açtığını ve mRNA FISH'ın, IHC'ye ek olarak, sıçan beynindeki spatiotemporal gen ekspresyon paternlerinin analizi için etkili bir yöntem olduğunu, fare proteinlerine karşı genellikle bulunmayan yüksek kaliteli antikorlara bağımlılığı hafiflettiğini göstermektedir. Th-Cre ve DAT-Cre sıçan çizgileri, dopaminerjik nöronların seçici alt kümelerinde Cre'yi ifade eder ve Parkinson hastalığı üzerine araştırmalar için özellikle yararlı olmalıdır.
Özgün kaynak özetini okuyun
The rat is a preferred model system over the mouse for neurological studies, and cell type-specific Cre expression in the rat enables precise ablation of gene function in neurons of interest, which is especially valuable for neurodegenerative disease modeling and optogenetics. Yet, few such Cre rats are available. Here we report the characterization of two Cre rats, tyrosine hydroxylase (TH)-Cre and dopamine active transporter (DAT or Slc6a3)-Cre, by using a combination of immunohistochemistry (IHC) and mRNA fluorescence in situ hybridization (FISH) as well as a fluorescent reporter for Cre activity. We detected Cre expression in expected neurons in both Cre lines. Interestingly, we also found that in Th-Cre rats, but not DAT-Cre rats, Cre is expressed in female germ cells, allowing germline excision of the floxed allele and hence the generation of whole-body knockout rats. In summary, our data demonstrate that targeted integration of Cre cassette lead to faithful recapitulation of expression pattern of the endogenous promoter, and mRNA FISH, in addition to IHC, is an effective method for the analysis of the spatiotemporal gene expression patterns in the rat brain, alleviating the dependence on high quality antibodies that are often not available against rat proteins. The Th-Cre and the DAT-Cre rat lines express Cre in selective subsets of dopaminergic neurons and should be particularly useful for researches on Parkinson's disease.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.