NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Optik atrofi 1 (OPA1) mutasyonlarına atfedilen ObjectiveDefektif mitokondriyal fonksiyon, öncelikle optik atrofi ve daha az yaygın olarak nörodejeneratif sendromlara neden olur. OPA1 mutasyonlarının bazılarında yaygın nöron kaybını tetiklediği, ancak hepsinde değil, hastalar bilinmemektedir. Burada, klasik göz hastalığı ile sendromik parkinsonizme karşı OPA1 haploinability'in biyolojisini yakalamak için izlenebilir indüklenmiş pluripotent kök hücre (iPSC) tabanlı bir model kullandık. MethodsiPSC'ler, OPA1 haploinability ve 2 kontrollü 2 hastadan üretildi ve dopaminerjik nöronlara ayrıldı. Metabolik profil, hücre dışı akı analizi, immünoblotting kullanan solunum kompleksi seviyeleri ve kolorimetrik bir tahlille karmaşık I aktivitesi ile belirlendi. Mitokondri iletim elektron mikroskobu ile incelenmiştir. Mitokondriyal DNA kopya numarası ve silmeleri uzun menzilli PCR kullanılarak test edildi. Mitokondrial membran potansiyeli tetrametilrhodamin metil ester alımı ile ölçüldü ve mitokondriyal parçalanma konfokal mikroskopi ile değerlendirildi. Exome dizilimi patojenik varyantları taramak için kullanıldı.ResultsOPA1 haploinyeterli iPSC'ler dopaminerjik nöronlara farklılaştı ve OPA1 protein seviyelerinde belirgin bir azalma sergiledi. OPA1'in kaybı oksidatif fosforilasyonda geç bir kusura, karmaşık I seviyelerinin azalmasına ve mitokondrinin ultrayapısında önemli bir değişiklik olmadan aktiviteye neden oldu. Kültürdeki nöronların kaybı sendromik hastalıktaki dopaminerjik dejenerasyonu yeniden ele alır ve mitokondriyal parçalanma ile ilişkilidir.InterpretationOPA1 seviyeleri, en azından kısmen, kompleks I'nin stabilitesini düzenleyerek iPSC kaynaklı nöronlarda oksidatif fosforilasyonu korur. OPA1 hastalığının şiddeti, öncelikle OPA1 aracılı füzyonun kapsamı ile ilişkilidir, bu mekanizmanın aktivasyonunun veya genetik değiştiricilerinin tanımlanmasının terapötik veya prognostik değere sahip olabileceğini düşündürmektedir. Ann Neurol 2018;83:915-925.
Özgün kaynak özetini okuyun
ObjectiveDefective mitochondrial function attributed to optic atrophy 1 (OPA1) mutations causes primarily optic atrophy and, less commonly, neurodegenerative syndromes. The pathomechanism by which OPA1 mutations trigger diffuse loss of neurons in some, but not all, patients is unknown. Here, we used a tractable induced pluripotent stem cell (iPSC)-based model to capture the biology of OPA1 haploinsufficiency in cases presenting with classic eye disease versus syndromic parkinsonism.MethodsiPSCs were generated from 2 patients with OPA1 haploinsufficiency and 2 controls and differentiated into dopaminergic neurons. Metabolic profile was determined by extracellular flux analysis, respiratory complex levels using immunoblotting, and complex I activity by a colorimetric assay. Mitochondria were examined by transmission electron microscopy. Mitochondrial DNA copy number and deletions were assayed using long-range PCR. Mitochondrial membrane potential was measured by tetramethylrhodamine methyl ester uptake, and mitochondrial fragmentation was assessed by confocal microscopy. Exome sequencing was used to screen for pathogenic variants.ResultsOPA1 haploinsufficient iPSCs differentiated into dopaminergic neurons and exhibited marked reduction in OPA1 protein levels. Loss of OPA1 caused a late defect in oxidative phosphorylation, reduced complex I levels, and activity without a significant change in the ultrastructure of mitochondria. Loss of neurons in culture recapitulated dopaminergic degeneration in syndromic disease and correlated with mitochondrial fragmentation.InterpretationOPA1 levels maintain oxidative phosphorylation in iPSC-derived neurons, at least in part, by regulating the stability of complex I. Severity of OPA1 disease associates primarily with the extent of OPA1-mediated fusion, suggesting that activation of this mechanism or identification of its genetic modifiers may have therapeutic or prognostic value. Ann Neurol 2018;83:915-925.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.