Characterization of Parkinson's disease-related pathogenic TMEM230 mutants.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Parkinson hastalığı (PD), en yaygın ikinci nörodejeneratif hastalıktır. PD vakalarının çoğu sporadik olmasına rağmen, bunların% 5-10'u kalıtsaldır ve ilişkili genlerdeki birkaç patojenik mutasyon tanımlanmıştır. TMEM230'daki mutasyonlar son zamanlarda otozomal dominant PD'nin bir nedeni olarak tanımlandı. Bununla birlikte, mutant proteinlerin temel özellikleri henüz bilinmemektedir. Stabilite ve nörotoksisiteyi, PD patogenezine bağlı proteinlerin önemli özelliklerini, WT TMEM230 ve iki patojenik mutantı, R78L ve PG5ext'i, dopaminerjik nöronal hücre hattında inceledik. Çalışmamız, aynı vektör omurgasında ifade edilen protein miktarının R78L > WT > PG5ext olduğunu göstermiştir. Mutant proteinlerin staabilitesi birbirine benzerdi, ancak WT'ninkinden daha düşüktü. Buna ek olarak, mutantların ve WT TMEM230'un aşırı ekspresyonu, boş bir vektörle transfekte edilen hücrelere kıyasla MPP+ tedavisi üzerine benzer nörotoksisite seviyelerine neden oldu. İki PD'ye neden olan gen olan TMEM230 ve LRRK2 tarafından kodlanan proteinler, vezikül kaçakçılığında işlev gördüğünden, etkileşimde bulunup bulunmadıklarını test ettik. LRRK2 ne TMEM230 ile etkileşime girer, ne de fosforile eder. Ayrıca TMEM230 aşırı ekspresyonundan sonra vezikül kaçakçılığına dahil olan birkaç Rab proteininin (Rab1A, 5, 7, 8A ve 11) seviyelerini araştırdık. Bununla birlikte, boş bir vektör, TMEM230 WT ve mutantları ifade eden hücrelerle enfekte olan hücreler arasında herhangi bir Rab proteini arasında net bir fark yoktu, bu da TMEM230'un bu Rab proteinlerini doğrudan düzenlemediğini düşündürdü. Bu nedenle, bu TMEM230 PG5ext ve R78L mutant proteinleri, stabiliteleri dışında WT proteinlerinden belirgin bir şekilde farklı değildir. Kısaltmalar: LRRK2: Leucine-zengin tekrar kinaz 2; PD: Parkinson hastalığı; AD: Alzheimer hastalığı; RT-PCR: ters transkripsiyon-polimeraz zincir reaksiyonu; SDS-PAGE: sodyum dodesil sülfat-poliakrilamid jel elektroforez; FACS: floresansla aktive edilmiş hücre tasnifi; PBS: fosfat tamponlanmış salin; FBS: fetal sığır.

Özgün kaynak özetini okuyun

Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease. Although most PD cases are sporadic, 5-10% of them are hereditary and several pathogenic mutations in related genes have been identified. Mutations in TMEM230 were recently identified as a cause of autosomal dominant PD. However, the basic properties of the mutant proteins are not yet known. We examined stability and neurotoxicity, important characteristics of PD pathogenesis-related proteins, of WT TMEM230 and two pathogenic mutants, R78L and PG5ext, in a dopaminergic neuronal cell line. Our study showed that amount of protein expressed in the same vector backbone was R78L > WT > PG5ext. The stabilities of the mutant proteins were similar to each other, but lower than that of the WT. In addition, overexpression of mutants and WT TMEM230 caused similar levels of neurotoxicity upon MPP+ treatment when compared to the cells transfected with an empty vector. Because the proteins encoded by two PD-causing genes, TMEM230 and LRRK2, function in vesicle trafficking, we tested whether they interact. LRRK2 neither interacts with, nor phosphorylates TMEM230. We also investigated the levels of several Rab proteins (Rab1A, 5, 7, 8A and 11) involved in vesicle trafficking after TMEM230 overexpression. However, there was no clear difference of any Rab proteins among cells transfected with an empty vector, TMEM230 WT and mutants-expressing cells, suggesting that TMEM230 does not directly regulate these Rab proteins. Thus, these TMEM230 PG5ext and R78L mutant proteins are not distinctly different from the WT proteins except for their stability. Abbreviations: LRRK2: Leucine-rich repeat kinase 2; PD: Parkinson's disease; AD: Alzheimer's disease; RT-PCR: reverse transcription-polymerase chain reaction; SDS-PAGE: sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis; FACS: fluorescence-activated cell sorting; PBS: phosphate buffered saline; FBS: fetal bovine serum; PI: propidium iodide.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.