NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
L-tirozinin arka plan üretimi, Parkinson hastalığının nörodejeneratif bir hastalık vakalarının artması nedeniyle 3,4-dihidroksifenil-L-alaninin (L-DOPA) pazar büyüklüğü arttıkça zemin kazanıyor. L-DOPA'ya dönüşüm için L-tirozini aşırı üretme girişimleri, kritik yol enzimlerinin aşırı ekspresyonuna, geri bildirime dayanıklı enzimlerin tanıtımına ve transkripsiyon düzenleyicilerinin deregülasyonuna dayanmıştır.ResultsAn E. coli BL21 (DE3), tyrR, ptsG, crr, pheA ve pykF'yi glP'nin aşırı ekspresyonu ile yönlendirirken silerekleyerek tasarlanmıştır. TktA ve PpsA da E4P ve PEP birikimini artırmak için aşırı ifade edildi. Yönlendirilmiş evrim daha sonra etkinliğini optimize etmek için HpaB'ye uygulandı. Üç mutantın, G883R, G883A, L1231M, sırasıyla L-DOPA üretiminde 3.03-, 2.9- ve 2.56 kat artış gösteren vahşi tip hpaB ile karşılaştırıldığında aktivitenin iyileştiği tespit edildi. Suş LP-8 kullanımı, sırasıyla silkme şişesinde 691.24 mg/L ve 25.53 g/L L-DOPA ve 5 L biyoreaktör üretimi ile sonuçlanmıştır.KatılımAnahtar enzimlerin, shikimat yoluna doğru akıyı kanallamak için kullanılması, yol enzimlerinin aşırı ekspresyonu ile birleştiğinde L-DOPA üretimi için L-tirozin kullanılabilirliğini artırmıştır. HpaB aktivitesinin arttırılması, L-DOPA üretimini glikoz ve gliserolden artırdı. Bu çalışma, L-tirozinin kullanılabilirliğinin artırılması ve enzim aktivitesinin artırılmasının maksimum L-DOPA üretkenliğini sağladığını göstermektedir.
Özgün kaynak özetini okuyun
BackgroundProduction of L-tyrosine is gaining grounds as the market size of 3,4-dihydroxyphenyl-L-alanine (L-DOPA) is expected to increase due to increasing cases of Parkinson's disease a neurodegenerative disease. Attempts to overproduce L-tyrosine for conversion to L-DOPA has stemmed on the overexpressing of critical pathway enzymes, an introduction of feedback-resistant enzymes, and deregulation of transcriptional regulators.ResultsAn E. coli BL21 (DE3) was engineered by deleting tyrR, ptsG, crr, pheA and pykF while directing carbon flow through the overexpressing of galP and glk. TktA and PpsA were also overexpressed to enhance the accumulation of E4P and PEP. Directed evolution was then applied on HpaB to optimize its activity. Three mutants, G883R, G883A, L1231M, were identified to have improved activity as compared to the wild-type hpaB showing a 3.03-, 2.9- and 2.56-fold increase in L-DOPA production respectively. The use of strain LP-8 resulted in the production of 691.24 mg/L and 25.53 g/L of L-DOPA in shake flask and 5 L bioreactor, respectively.ConclusionDeletion of key enzymes to channel flux towards the shikimate pathway coupled with the overexpression of pathway enzymes enhanced the availability of L-tyrosine for L-DOPA production. Enhancing the activity of HpaB increased L-DOPA production from glucose and glycerol. This work demonstrates that increasing the availability of L-tyrosine and enhancing enzyme activity ensures maximum L-DOPA productivity.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.