Endogenous Rab29 does not impact basal or stimulated LRRK2 pathway activity.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

LRRK2 protein kinaz aktivitesini artıran mutasyonlar kalıtsal Parkinson hastalığına neden olur. LRRK2, efektör bağlayıcı switch-II motifi içinde Rab10 ve Rab12 de dahil olmak üzere bir grup Rab GTPaz proteinini fosforile eder. Önceki çalışmalar, Rab29 için gen kodlamasını barındıran PARK16 lokusunun Parkinson'da yer aldığını ve Rab29'un LRRK2 ile ortak bir yolda çalıştığını göstermiştir. Rab29 ve LRRK2'nin eş ifadesi, LRRK2'yi trans Golgi ağının yüzeyine çekerek LRRK2 aktivitesini uyarır. Burada, Rab29'un nakavt edilmesinin endojen LRRK2 aktivitesini etkilemediğini, Rab10 ve Rab12 fosforilasyonunun değerlendirilmesine dayanarak, vahşi tip LRRK2, LRRK2[R1441C] veya VPS35[D620N] nakavt fare dokuları ve beyin ekstraktları ve embriyonik fibroblastlar dahil olmak üzere birincil hücre çizgilerinde etki etmediğini bildiriyoruz. Beyin ekstraktlarında, Rab12 fosforilasyonunun LRRK2 inhibitörleri ve patojenik mutasyonlardan Rab10 fosforilasyondan daha güçlü bir şekilde etkilendiğini görüyoruz. Bir fare modelinde Rab29'un transgenik aşırı ekspresyonu da bazal LRRK2 aktivitesini uyarmak için yetersizdi. Endolizomal sistemi (nigerisin, mononsin, klorokin ve LLOMe) vurgulayan ajanlar tarafından indüklenen Rab10 ve Rab12 fosforilasyonunun uyarılmasının LRRK2 inhibitörleri tarafından bastırıldığını, ancak Rab29 yetersiz hücrelerde engellenmediğini gözlemledik. Test edilen ajanlardan, nigerisin Rab10 ve Rab12 fosforilasyonunda (5 ila 9 kat) en büyük artışı indükledi. Bulgularımız bazal, patojenik, nijerisin ve monenin uyarılmış LRRK2 yol aktivitesinin Rab29 tarafından kontrol edilmediğini göstermektedir. LRRK2 aktivitesinin nasıl düzenlendiğini ve diğer Rab proteinlerinin LRRK2'yi farklı membranlara hedefleyerek kontrol edip edemeyeceğini belirlemek için daha fazla çalışma gerekmektedir.

Özgün kaynak özetini okuyun

Mutations that enhance LRRK2 protein kinase activity cause inherited Parkinson's disease. LRRK2 phosphorylates a group of Rab GTPase proteins, including Rab10 and Rab12, within the effector-binding switch-II motif. Previous work has indicated that the PARK16 locus, which harbors the gene encoding for Rab29, is involved in Parkinson's, and that Rab29 operates in a common pathway with LRRK2. Co-expression of Rab29 and LRRK2 stimulates LRRK2 activity by recruiting LRRK2 to the surface of the trans Golgi network. Here, we report that knock-out of Rab29 does not influence endogenous LRRK2 activity, based on the assessment of Rab10 and Rab12 phosphorylation, in wild-type LRRK2, LRRK2[R1441C] or VPS35[D620N] knock-in mouse tissues and primary cell lines, including brain extracts and embryonic fibroblasts. We find that in brain extracts, Rab12 phosphorylation is more robustly impacted by LRRK2 inhibitors and pathogenic mutations than Rab10 phosphorylation. Transgenic overexpression of Rab29 in a mouse model was also insufficient to stimulate basal LRRK2 activity. We observed that stimulation of Rab10 and Rab12 phosphorylation induced by agents that stress the endolysosomal system (nigericin, monensin, chloroquine and LLOMe) is suppressed by LRRK2 inhibitors but not blocked in Rab29 deficient cells. From the agents tested, nigericin induced the greatest increase in Rab10 and Rab12 phosphorylation (5 to 9-fold). Our findings indicate that basal, pathogenic, as well as nigericin and monensin stimulated LRRK2 pathway activity is not controlled by Rab29. Further work is required to establish how LRRK2 activity is regulated, and whether other Rab proteins can control LRRK2 by targeting it to diverse membranes.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.