NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Nöral rozetler (NPC rosettes), insan pluripotent kök hücre (hPSC) kaynaklı nöral progenitör hücrelerin (NPC) monolayer kültürlerinde stokastik olarak ortaya çıkan merkezi bir lümenin etrafındaki radyal olarak düzenlenmiş hücre gruplarıdır. NPC rozet oluşumunun erken nöral tüpteki hücre davranışını taklit ettiği düşünüldüğünden, bu rozetler nöral tüp morfogenezinin çalışması için önemli in vitro modelleri temsil eder. Bununla birlikte, mevcut protokolleri kullanarak, NPC rozet oluşumu senkronize değildir ve sonuçlar farklı hPSC hatları arasında tutarsızdır, nicel mekanistik analizleri engeller ve canlı hücre görüntülemesine meydan okur. Burada, NPC'nin eşit büyüklükteki "kolonilerinin" eşit polarize NESTIN+/PAX6+/PAX3+/DACH1+ NPC monolayerlerinin fiziksel olarak kesilmesi yoluyla üretilmesinden sonra 6 saat içinde rozet oluşumunu indüklemek için hızlı ve sağlam bir protokol bildiriyoruz. Bu NPC rozetleri, birincil silia ile kaplanmış apikal polarize lümenler gösterir. Bu tahlili kullanarak, son zamanlarda çocuk Parkinsonizm için bir aday gen olarak tanımlanan önemli bir apikal determinant olan PODXL yokluğunda azalmış lümen boyutunu gösteriyoruz. İlginç bir şekilde, zaman atlamalı görüntüleme, radyal organizasyon ve apikal lümen oluşumuna ek olarak, kesilmiş NPC kolonileri içindeki hücrelerin hızlı bazal olarak yönlendirilen yayılmayı başlattığını ortaya koymaktadır. Dahası, kimyasal, genetik ve biyomekanik araçlar kullanarak, NPC roset morfojenezinin bu bazal yayılma aktivitesini gerektirdiğini ve yayılmanın Rho / ROCK sinyallemesi tarafından sıkı bir şekilde düzenlendiğini gösteriyoruz. Bu sağlam ve nicel NPC rozet platformu, NPC rozet morfojenezinin altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaların daha fazla araştırılması için hassas bir sistem sağlar.
Özgün kaynak özetini okuyun
Neural rosettes (NPC rosettes) are radially arranged groups of cells surrounding a central lumen that arise stochastically in monolayer cultures of human pluripotent stem cell (hPSC)-derived neural progenitor cells (NPC). Since NPC rosette formation is thought to mimic cell behavior in the early neural tube, these rosettes represent important in vitro models for the study of neural tube morphogenesis. However, using current protocols, NPC rosette formation is not synchronized and results are inconsistent among different hPSC lines, hindering quantitative mechanistic analyses and challenging live cell imaging. Here, we report a rapid and robust protocol to induce rosette formation within 6 h after evenly-sized "colonies" of NPC are generated through physical cutting of uniformly polarized NESTIN+/PAX6+/PAX3+/DACH1+ NPC monolayers. These NPC rosettes show apically polarized lumens studded with primary cilia. Using this assay, we demonstrate reduced lumenal size in the absence of PODXL, an important apical determinant recently identified as a candidate gene for juvenile Parkinsonism. Interestingly, time lapse imaging reveals that, in addition to radial organization and apical lumen formation, cells within cut NPC colonies initiate rapid basally-driven spreading. Further, using chemical, genetic and biomechanical tools, we show that NPC rosette morphogenesis requires this basal spreading activity and that spreading is tightly regulated by Rho/ROCK signaling. This robust and quantitative NPC rosette platform provides a sensitive system for the further investigation of cellular and molecular mechanisms underlying NPC rosette morphogenesis.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.