Rational Generation of Monoclonal Antibodies Selective for Pathogenic Forms of Alpha-Synuclein.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Alfa-sinükleinin (alfa-Syn) yanlış katlanmış toksik formları, Parkinson hastalığı (PD), Lewy cisimleriyle demans (DLB) ve çoklu sistem atrofisi (MSA) dahil olmak üzere sinükleinopatilerin patogenezine dahil edilmiştir. Alfa-Syn oligomerlerinin ve çözünür fibrillerin nörotoksisite ve patolojinin hücre hücreden hücreye yayılımına aracılık ettiği gösterilmiştir. Alfa-Syn'in patojenik formlarını seçici olarak hedefleyebilen antikorlar üretmek için, hesaplamalı modelleme, oligomerler ve küçük çözünür fibriller üzerinde maruz kalması muhtemel konformasyonel epitopları tahmin etmek için kullanıldı, ancak monomerler veya tamamen çözünmeyen fibriller üzerinde değil. Bu konformasyonel epitopları yeniden üreten siklik peptit iskeleleri, biyolojik alakalarını gösteren nörotoksisite ve tohumlama aktivitesi sergiledi. Konformasyonel epitoplarla bağışıklık, monomerler, fizyolojik tetramerler veya Lewy cisimleri ile çok az veya hiç reaktivite olmaksızın toksik alfa-Syn oligomerleri ve çözünür fibriller için seçicilik gösteren istenen bağlanma profili ile monoklonal antikorlara (mAbs) yol açtı. DLB ve MSA hastalarından beyin ekstraktlarında doğal olarak oluşan çözünebilir alfa-Syn agregalarının tanınması, yüzey plazmon rezonansı (SPR) ile doğrulandı. Buna ek olarak, mAbs, tiyoflavin-T floresan esaslı bir toplama testinde sonikasyon öncesi şekillendirilmiş fibrillerin (PFF'ler) tohumlama aktivitesini inhibe etti. Nöronal kültürlerde, mAbs birincil sıçan nöronlarını toksik alfa-Syn oligomerlerinden korudu, PFF'lerin alımını azalttı ve endojen alfa-Syn'in patojenik fosforile edilmiş agregalarının indüksiyonunu engelledi. Alfa-Syn'in patojenik türleri için seçici koruyucu antikorların, pan alfa-Syn reaktivitesinin aksine, normal alfa-Syn fonksiyonunu koruyarak ve aktif antikorun dolaşım ve merkezi sinir sistemindeki daha bol miktarda toksik olmayan alfa-Syn formları tarafından hedeften saptırılmasını en aza indirerek gelişmiş güvenlik ve terapötik güç sağlaması beklenir.

Özgün kaynak özetini okuyun

Misfolded toxic forms of alpha-synuclein (α-Syn) have been implicated in the pathogenesis of synucleinopathies, including Parkinson's disease (PD), dementia with Lewy bodies (DLB), and multiple system atrophy (MSA). The α-Syn oligomers and soluble fibrils have been shown to mediate neurotoxicity and cell-to-cell propagation of pathology. To generate antibodies capable of selectively targeting pathogenic forms of α-Syn, computational modeling was used to predict conformational epitopes likely to become exposed on oligomers and small soluble fibrils, but not on monomers or fully formed insoluble fibrils. Cyclic peptide scaffolds reproducing these conformational epitopes exhibited neurotoxicity and seeding activity, indicating their biological relevance. Immunization with the conformational epitopes gave rise to monoclonal antibodies (mAbs) with the desired binding profile showing selectivity for toxic α-Syn oligomers and soluble fibrils, with little or no reactivity with monomers, physiologic tetramers, or Lewy bodies. Recognition of naturally occurring soluble α-Syn aggregates in brain extracts from DLB and MSA patients was confirmed by surface plasmon resonance (SPR). In addition, the mAbs inhibited the seeding activity of sonicated pre-formed fibrils (PFFs) in a thioflavin-T fluorescence-based aggregation assay. In neuronal cultures, the mAbs protected primary rat neurons from toxic α-Syn oligomers, reduced the uptake of PFFs, and inhibited the induction of pathogenic phosphorylated aggregates of endogenous α-Syn. Protective antibodies selective for pathogenic species of α-Syn, as opposed to pan α-Syn reactivity, are expected to provide enhanced safety and therapeutic potency by preserving normal α-Syn function and minimizing the diversion of active antibody from the target by the more abundant non-toxic forms of α-Syn in the circulation and central nervous system.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.