Parkin drives pS65-Ub turnover independently of canonical autophagy in Drosophila.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Parkinson hastalığı ile ilgili proteinler, PINK1 ve Parkin, mitokondriyal kalite kontrolünü korumak için ortak bir yolda hareket eder. PINK1-Parkin yolu, hücre kültüründe mitokondriyal toksifikasyonu takiben otofajik mitokondriyal ciroyu (mitofaji) teşvik edebilirken, alternatif kalite kontrol yolları önerilmektedir. PINK1-Parkin yolunun in vivo olarak çalıştığı mekanizmaları analiz etmek için, Drosophila'da Ser65-fosforilatlı ubiquitin (pS65-Ub) tespit etmek için yöntemler geliştirdik. Oksidanslı paraquat'a maruz kalmak, sağlam, Pink1 bağımlı pS65-Ub üretimine yol açarken, pS65-Ub, engellenmiş bozulma ile tutarlı, uyarılmamış parkin-null sineklerinde birikmektedir. Ek olarak, pS65-Ub'un özellikle in vivo'da bozulmuş mitokondri üzerinde biriktiğini gösteriyoruz. Çekirdek otofaji proteinlerinin Atg1, Atg5 ve Atg8a'nın tükenmesi, parkin kaybıyla aynı ölçüde pS65-Ub birikimine neden olmadı ve parkin aşırı ekspresyonu, hem bazal hem de paraquat kaynaklı pS65-Ub'nin bir Atg5-null arka planında cirosunu artırdı. Bu nedenle, pS65-Ub immunodetection'ın muhabir yapılarına alternatif olarak Pink1-Parkin fonksiyonunu in vivo analiz etmek için kullanılabileceğini belirledik. Dahası, bulgularımız Pink1-Parkin yolunun, in vivo'daki kanonik otofajiden bağımsız olarak mitokondriyal ciroyu destekleyebileceğini göstermektedir.

Özgün kaynak özetini okuyun

Parkinson's disease-related proteins, PINK1 and Parkin, act in a common pathway to maintain mitochondrial quality control. While the PINK1-Parkin pathway can promote autophagic mitochondrial turnover (mitophagy) following mitochondrial toxification in cell culture, alternative quality control pathways are suggested. To analyse the mechanisms by which the PINK1-Parkin pathway operates in vivo, we developed methods to detect Ser65-phosphorylated ubiquitin (pS65-Ub) in Drosophila. Exposure to the oxidant paraquat led to robust, Pink1-dependent pS65-Ub production, while pS65-Ub accumulates in unstimulated parkin-null flies, consistent with blocked degradation. Additionally, we show that pS65-Ub specifically accumulates on disrupted mitochondria in vivo. Depletion of the core autophagy proteins Atg1, Atg5 and Atg8a did not cause pS65-Ub accumulation to the same extent as loss of parkin, and overexpression of parkin promoted turnover of both basal and paraquat-induced pS65-Ub in an Atg5-null background. Thus, we have established that pS65-Ub immunodetection can be used to analyse Pink1-Parkin function in vivo as an alternative to reporter constructs. Moreover, our findings suggest that the Pink1-Parkin pathway can promote mitochondrial turnover independently of canonical autophagy in vivo.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.