NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
BackgroundVentral midbrain (VM) insan pluripotent kök hücrelerden elde edilen dopaminerjik progenitör hücreler, endojen olarak kaybedilen dopamin nöronlarının yerini alma potansiyeline sahiptir ve şu anda Parkinson Hastalığı (PD) tedavisi için klinik öncesi ve klinik gelişim aşamasındadır. Bununla birlikte, hücrelerin kalite kontrolünde temel bir zorluk, rostral ve caudal VM progenitörlerinin transkripsiyonel olarak son derece benzer olmalarıdır, ancak sadece caudal VM hücreleri, PD'de hücre replasmanıyla ilgili işlevsellikle dopaminerjik (DA) nöronlara yol açar. Bu nedenle, klinik üretim sırasında hızla ve güvenilir bir şekilde caudal VM hücrelerinden rostral ayırt edebilen tahliller geliştirmek için kritik öneme sahiptir. MethodsBiz caudal VM'den DA progenitorlerine özgü yeni salgılanmış biyobelirteçleri aramak için rostral ve caudal VM progenitor hücrelerinden hücre kültürü süpernatanları üzerinde av tüfeği proteomikleri gerçekleştirdik. Anahtar isabetler qRT-PCR ve ELISA tarafından doğrulandı.SonuçlarKaudal VM progenitor kültürlerinde (CPE, LGI1 ve PDGFC) zenginleştirilmiş yeni salgılanmış işaretleyicileri tanımladık ve doğruladık ve bu işaretleyicilerin DA hücre transplantasyon ürünlerinde başarılı bir greft sonucu için öngörücü bir işaret olan EN1 ifadesiyle güçlü bir şekilde ilişkili olduğunu bulduk. Diğer işaretleyicilerin (CNTN2 ve CORIN) dopaminerjik olmayan rostral VM kültürlerinde tersine zenginleştiği bulunmuştur. Anahtar roman ELISA belirteçleri, GMP tarafından üretilen caudal VM partilerinden süpernatant numuneleri üzerinde daha da doğrulandı.Klinik üretim sırasında caudal VM DA hücrelerinin doğru desenli partilerini tahmin etmek için invazif olmayan bir süreç içi kalite kontrol testi olarak, farklılaşmanın 16. günü civarında LGI1 / CORIN oranlarını ölçen çift ELISA panelini önermekteyiz.
Özgün kaynak özetini okuyun
BackgroundVentral midbrain (VM) dopaminergic progenitor cells derived from human pluripotent stem cells have the potential to replace endogenously lost dopamine neurons and are currently in preclinical and clinical development for treatment of Parkinson's Disease (PD). However, one main challenge in the quality control of the cells is that rostral and caudal VM progenitors are extremely similar transcriptionally though only the caudal VM cells give rise to dopaminergic (DA) neurons with functionality relevant for cell replacement in PD. Therefore, it is critical to develop assays which can rapidly and reliably discriminate rostral from caudal VM cells during clinical manufacturing.MethodsWe performed shotgun proteomics on cell culture supernatants from rostral and caudal VM progenitor cells to search for novel secreted biomarkers specific to DA progenitors from the caudal VM. Key hits were validated by qRT-PCR and ELISA.ResultsWe identified and validated novel secreted markers enriched in caudal VM progenitor cultures (CPE, LGI1 and PDGFC), and found these markers to correlate strongly with the expression of EN1, which is a predictive marker for successful graft outcome in DA cell transplantation products. Other markers (CNTN2 and CORIN) were found to conversely be enriched in the non-dopaminergic rostral VM cultures. Key novel ELISA markers were further validated on supernatant samples from GMP-manufactured caudal VM batches.ConclusionAs a non-invasive in-process quality control test for predicting correctly patterned batches of caudal VM DA cells during clinical manufacturing, we propose a dual ELISA panel measuring LGI1/CORIN ratios around day 16 of differentiation.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.