NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Hücrelerde, mitokondri sürekli füzyon ve fisyona uğrar. Fisyon için önemli bir faktör memeli dinamin ile ilişkili protein 1 (Drp1) 'dir. Drp1'in disregülasyonu, Parkinson, kardiyovasküler hastalıklar ve kanser de dahil olmak üzere nörodejeneratif hastalıklarla ilişkilidir ve Drp1'i mitokondrial durum ve potansiyel patofizyolojik koşulları izlemek için önemli bir biyobelirteç haline getirir. Burada, proteomik, gelişmiş mikroskopi ve Drp1'in canlı hücre görüntülemesi için çok yönlü bağlayıcı moleküller olarak nanobodileri (Nbs) geliştirdik. Proteomikler için etkileşen proteinlerle endojen Drp1'i özellikle zenginleştirmek için, yüksek afiniteli Nbs'i gelişmiş yakalama matrislerine işlevselleştirdik. Ayrıca, Drp1'i süper çözünürlüklü STORM mikroskobunda site yönlendirmeli florofor etiketleme ile birleştirilen iki değerli Nbs ile tespit ettik. Drp1'in gerçek zamanlı görüntülenmesi için, hücre içi olarak floresan etiketli Nbs'yi, sözde kromobodileri (Cbs) ifade ettik. Sinyal-gürültü oranını iyileştirmek için, Cbs'yi daha da "dönüş-hızlandırılmış" bir formata dönüştürdük. Bu görüntüleme sondaları ile, canlı hücrelerde bileşik kaynaklı mitokondriyal fisyon üzerine endojen Drp1'in dinamiklerini görselleştirdik. Çok çeşitli araştırma uygulamaları göz önüne alındığında, sunulan Nb araç seti, Drp1'in hastalıkla ilgili modellerinde gelişmiş fonksiyonel çalışmalar için yeni olanaklar açacaktır.
Özgün kaynak özetini okuyun
In cells, mitochondria undergo constant fusion and fission. An essential factor for fission is the mammalian dynamin-related protein 1 (Drp1). Dysregulation of Drp1 is associated with neurodegenerative diseases including Parkinson's, cardiovascular diseases and cancer, making Drp1 a pivotal biomarker for monitoring mitochondrial status and potential pathophysiological conditions. Here, we developed nanobodies (Nbs) as versatile binding molecules for proteomics, advanced microscopy and live cell imaging of Drp1. To specifically enrich endogenous Drp1 with interacting proteins for proteomics, we functionalized high-affinity Nbs into advanced capture matrices. Furthermore, we detected Drp1 by bivalent Nbs combined with site-directed fluorophore labelling in super-resolution STORM microscopy. For real-time imaging of Drp1, we intracellularly expressed fluorescently labelled Nbs, so-called chromobodies (Cbs). To improve the signal-to-noise ratio, we further converted Cbs into a "turnover-accelerated" format. With these imaging probes, we visualized the dynamics of endogenous Drp1 upon compound-induced mitochondrial fission in living cells. Considering the wide range of research applications, the presented Nb toolset will open up new possibilities for advanced functional studies of Drp1 in disease-relevant models.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.