LRRK2 interactions with microtubules are independent of LRRK2-mediated Rab phosphorylation.

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Deregüle olmuş mikrotübüller nörodejeneratif hastalıklarla ilişkili yaygın kusurlardır. Parkinson hastalığı ile ilişkili LRRK2'yi ifade eden hücre hatlarındaki son kriyo-elektron mikroskopi çalışmaları, mikrotübül yüzeylerin farklı LRRK2 konformasyonlarını dengeleyerek kinaz aktivitesini düzenleyebileceğini düşündürmektedir. Yüksek endojen LRRK2 ekspresyonuna sahip makrofajlarda, nokodazol tedavisinin mikrotübülleri bozduğunu ve LRRK2 aracılı Rab fosforilasyonunu bozduğunu görüyoruz. GTP takviyesi, LRRK2 kinaz eylemini hücresel GTP seviyelerine bağlayan nocodazole indirgenmiş Rab fosforilasyonunu geri yükler. Kimyasal mikrotübül stabilizasyonu ve LRRK2'yi mikrotübül yüzeylerine kinetik olarak hapsetmek, Rab fosforilasyon üzerinde ihmal edilebilir etkilere sahiptir. Buna karşılık, LRRK2'yi LAMP1-pozitif membranlara hapsetmek LRRK2-ortamlı Rab fosforilasyonunu yükseltir. Yakınlık etiketleme proteomikleri ve colocalization çalışmaları, LRRK2'nin hem polimerize hem de serbest tubulin ile geçici olarak ve LRRK2 kinaz aktivitesinden bağımsız olarak güçlü bir şekilde etkileşime girdiğini göstermektedir. Nöron ve makrofajlardaki tip I inhibitörleri ile kompleksleşmiş endojen LRRK2, mikrotübüllerle stabil bir şekilde etkileşime girememektedir, oysa LRRK2'ye kaynaşmış hantal N-terminal etiketler hücre hatlarında kararlı mikrotübül bağlanmasını teşvik eder. Toplu olarak, bu sonuçlar tubulin izoformlarının ve mikrotübüllerin geçici LRRK2-etkileyici proteinlerin LRRK2- aracılı Rab fosforilasyon için gerekli olmadığını göstermektedir.

Özgün kaynak özetini okuyun

Deregulated microtubules are common defects associated with neurodegenerative diseases. Recent cryo-electron microscopy studies in cell lines overexpressing Parkinson's disease-associated LRRK2 suggest microtubule surfaces may regulate kinase activity by stabilizing different LRRK2 conformations. In macrophages with high endogenous LRRK2 expression, we find that nocodazole treatment destabilizes microtubules and impairs LRRK2-mediated Rab phosphorylation. GTP supplementation restores nocodazole-reduced Rab phosphorylation, linking LRRK2 kinase action to cellular GTP levels. Chemical microtubule stabilization, and kinetically trapping LRRK2 to microtubule surfaces, has negligible effects on Rab phosphorylation. In contrast, trapping LRRK2 to LAMP1-positive membranes upregulates LRRK2-mediated Rab phosphorylation. Proximity-labeling proteomics and colocalization studies show that LRRK2 robustly interacts with both polymerized and free tubulin transiently and independently of LRRK2 kinase activity. Endogenous LRRK2 complexed with type I inhibitors in neurons and macrophages fails to stably interact with microtubules, whereas bulky N-terminal tags fused to LRRK2 promotes stable microtubule binding in cell lines. Collectively, these results show that tubulin isoforms and microtubules are transient LRRK2-interacting proteins non-essential for LRRK2-mediated Rab phosphorylation.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.