NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Birden fazla pestisit ve çözücü Parkinson hastalığı [1] ve diğer nörodejeneratif hastalıklar için risk faktörleri olsa da, çoğu risk faktörü keşfedilmemiş olarak kalır. Daha önce metallothionein geni MT1G'yi LUHMES dopaminerjik nöronlarında test edilen yedi nörotoksik maddenin hepsi tarafından indüklenen nörotoksisite için bir biyobelirteç olarak belirledik. Burada, LUHMES hücre hattının MT1G genine bir HiBIT etiketi eklemek için CRISP / R teknolojisini kullandık. Mühendislik LUHMES MT1G::HiBIT hücre hatları, 1536 iyi mikroplakalı bir 3D süspansiyon kültür platformunda nicel yüksek verim taraması [2] tahlili geliştirmek için kullanıldı. 1280 bileşikten oluşan LOPAC (Library of Pharmalogically Active Compounds) koleksiyonunu ve 88 seçilmiş Tox21 kimyasalını tarayarak bu qHTS testini doğruladık ve yüksek gürültü sinyali ve tekrarlanabilirlik gösterdik. Bu kütüphanenin taranmasında, 49 bileşiğin MT1G-HiBIT aktivitesini önemli ölçüde artırdığı doğrulandı; 50 mM'nin altında sitotoksisite gösteren 35 bileşik ve 14 noncytotoksik bileşik dahil. Bu MT1G-HiBIT indükleyicilerinin çoğu, MT1G-HiBIT aktivasyon potenslerinden (AC50) orta derecede daha yüksek konsantrasyonlarda hücreleri öldürdü, ancak 14, MT1G-HiBIT AC50 değerlerini sitotoksisite IC50 değerlerinden 3 kat daha düşük gösterdi ve ikisi daha yüksek değerler gösterdi. 49 MT1G-HiBIT indükleyicisi arasında 45 bileşik şelatöre benziyordu. Bu görünen ilişkiyi test etmek için, bilinen 27 şelatör toplandı ve test edildi. Bunlardan 23'ü MT1G-HiBIT aktivite testinde aktifti, bu da şelatörlerin MT1G transkripsiyonunu aktive etme eğilimini doğruladı. Bu onaylanmış tahlille kimyasal kütüphaneleri taramak ve aktif kimyasalların kültürlenmiş nöronlar üzerindeki etkilerini karakterize etmek, nörodejeneratif hastalıklara neden olabilecek nörotoksik maddelerin veya nörotoksik kemotiplerin tanımlanmasını sağlayabilir.
Özgün kaynak özetini okuyun
Although multiple pesticides and solvents are risk factors for Parkinson's disease [1] and other neurodegenerative diseases, most risk factors remain undiscovered. We previously identified the metallothionein gene MT1G as a biomarker for neurotoxicity induced by all seven neurotoxicants tested in LUHMES dopaminergic neurons. Here we used CRISP/R technology to insert a HiBiT tag into the MT1G gene of the LUHMES cell line. The engineered LUHMES MT1G::HiBiT cell lines were used to develop a quantitative high throughput screening [2] assay in a 3D-suspension culture platform with 1536 well microplates. We validated this qHTS assay by screening the LOPAC (Library of Pharmacologically Active Compounds) collection composed of 1280 compounds plus 88 selected Tox21 chemicals, demonstrating high signal-to-noise and reproducibility. In screening this library, 49 compounds were confirmed to significantly increase MT1G-HiBiT activity, including 35 compounds that exhibited cytotoxicity below 50 μM, and 14 noncytotoxic compounds. Most of these MT1G-HiBiT inducers killed cells at concentrations moderately higher than their MT1G-HiBiT activation potencies (AC50), however 14 showed MT1G-HiBiT AC50 values more than 3-fold lower than cytotoxicity IC50 values, and two showed higher values. Among the 49 MT1G-HiBiT inducers, 45 compounds resembled chelators. To test this apparent association, 27 known chelators were gathered and tested. Of these, 23 were active in the MT1G-HiBiT activity assay, confirming the propensity of chelators to activate MT1G transcription. Screening chemical libraries with this validated assay and characterizing the effects of active chemicals on cultured neurons may enable the identification of neurotoxicants or neurotoxic chemotypes that may cause neurodegenerative diseases.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.