NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Özet Endoplazmik retikulum stres (ERS), Parkinson hastalığında (PD) önemli bir patolojik mekanizmadır ve uzun ERS sonuçta hücresel apoptoza yol açabilir. Bu çalışma, Lycium barbarum polisakkaritlerinin (LBP) sinir hücrelerinde MPP+ kaynaklı hasara karşı nöroprotektif etkilerini araştırmayı amaçlamıştır. Hücreler MPP+ ile 24 saat tedavi edildi, ardından 24 saat daha LBP tedavisi uygulandı. Western blot analizi, Kontrol grubuna kıyasla MPP+ tedavisinin, Bcl-2'yi düşürürken, GRP78, p-IRE1alpha, p-eIF2alpha, ATF-6, CHOP, kaspaz-3 ve Bax'ın ekspresyonunu yükselttiğini ortaya koydu. Buna karşılık, LBP tedavisi, ERS ve pro-apoptotik belirteçlerin düzenlenmesini engelleyerek ve Bcl-2 ifadesini geri yükleyerek bu etkilere önemli ölçüde karşı koydu. Ubiquitin özgül protease 10 (USP10) knockdown, MPP+ yaralı sinir hücrelerinde LBP'nin koruyucu etkilerini zayıflattı. Ayrıca, ko-immünopresipitasyon ve immünofloresans ko-lokalizasyon analizleri, USP10 ve Yes-ilişkili protein 1 (YAP1) arasındaki etkileşimi doğruladı. Deubiquitination deneyleri, USP10'un YAP1 ubiquitinasyonu azalttığını ve protein stabilitesini artırdığını göstermiştir. Ek olarak, USP10'un PERK / eIF2alpha / ATF-4 / CHOP yolunu YAP1 ubiquitinasyonu engelleyerek baskıladığını, böylece MPP + indüklenen ERS ve apoptozu hafiflettiğini gösterdik. Özetle, bulgularımız, LBP'nin YAP1'in USP10 aracılı deubidinasyonunu teşvik ederek ve daha sonra PERK sinyalleme yolunu inhibe ederek MPP+ kaynaklı nöronal yaralanmayı zayıflattığını göstermektedir. Bu bulgular, PD'nin klinik tedavisi için yeni bir yön ve stratejinin yanı sıra PD'de temel araştırmalar için yeni bir yol sunmaktadır. Arka plan: Endoplazmik retikulum stresi (ERS), Parkinson hastalığının (PD) önemli bir patogenezidir. Kronik ERS hücre apoptozuna neden olabilir. Lycium barbarum polisakkaritler (LBP), nöroprotektif, anti-inflamatuar ve anti-apoptotik etkilere sahip bir protein polisakkarit türüdür ve nörodejeneratif hastalıklar üzerinde potansiyel terapötik etkilere sahiptir. Amaç : Bu çalışma, LBP'nin MPP + indüklenen sinir hücreleri üzerindeki nöroprotektif etkisini ve potansiyel moleküler düzenleyici mekanizmasını araştırmayı amaçlamaktadır. Yöntem: Sinir hücresi 24 saat boyunca MPP+ ile indüklendi, ardından başka bir 24 saat için LBP tedavisi uygulandı. Sinir hücreleri USP10 ve YAP1 overexpression plazmidleri ve spesifik siRNA'larla transfect edildi. PERK pathway inhibitörü GSK2606414, YAP1 knockdown'ın etkilerini gidermek için kullanıldı. Daha sonraki değerlendirmeler hücre canlılığı için CCK-8 tahlilini, ERS ile ilgili proteinler için Batı lekelemesini, hücre apoptozu ve mitokondriyal membran potansiyeli için akış sitometrisini, protein lokalizasyonu için immünofloresans, hücre içi kalsiyum homeostaz için kalsiyum problarını kapsamıştır. USP10 ve YAP1 arasındaki etkileşim, ko-immünoprecipitation ile doğrulandı. Sonuç : Sinir hücrelerinde MPP + endoplazmik retikulum (ER) şişmesi, vakuolizasyon ve hücre içi kalsiyum dengesizliğini indükler. Endoplazmik retikulum stres belirteçlerinin (GRP78, p-PERK, p-eIF2alpha, ATF-4, CHOP) ve pro-apoptotik proteinlerin (kapaz-3, Bax) ekspresyonunu eşzamanlı olarak yükseltirken, anti-apoptotik protein Bcl-2'nin ekspresyonunu da düşürür. Bu değişiklikler sonuçta endoplazmik retikulum stresini, oksidatif stresi ve hücresel apoptozu teşvik eder. LBP, kalsiyum homeostazını geri kazanarak ve stres ve apoptozla ilişkili proteinleri azaltarak bu değişiklikleri hafifletir, bu da USP10 knockdown ile kaldırılan bir etkidir. USP10, YAP1 ubiquitinasyonu engelleyerek bu korumaya aracılık eder. Özellikle, PERK inhibitörü GSK2606414, YAP1 susturulmasından kaynaklanan apoptotik ve stres proteinlerinin gelişmiş ekspresyonunu tersine çevirdi. Sonuç : Bu sonuçlar, LBP'nin MPP+ kaynaklı ERS ve hücre apoptozunu hafifleterek nöroprotektif etkiler gösterdiğini göstermektedir. Altta yatan mekanizma, USP10 aracılı YAP1'in deubiquitinasyonunun yukarı düzenlenmesini içerir, bu da PERK sinyalleme yolunun aktivitesini bastırır. Sonuçlarımız, PD'nin klinik tedavisi için yeni bir yön ve stratejinin yanı sıra PD'de temel araştırmalar için yeni bir yol sunmaktadır.
Özgün kaynak özetini okuyun
Abstract Endoplasmic reticulum stress (ERS) is a significant pathological mechanism in Parkinson's disease (PD), and prolonged ERS can ultimately lead to cellular apoptosis. This study aimed to investigate the neuroprotective effects of Lycium barbarum polysaccharides (LBP) against MPP⁺-induced damage in Neural cells. The cells were treated with MPP⁺ for 24 hours, followed by LBP treatment for another 24 hours. Western blot analysis revealed that, compared to the Control group, MPP⁺ treatment upregulated the expression of GRP78, p-IRE1α, p-eIF2α, ATF-6, CHOP, caspase-3 and Bax, while downregulating Bcl-2. In contrast, LBP treatment significantly counteracted these effects by inhibiting the upregulation of ERS and pro-apoptotic markers and restoring Bcl-2 expression. Knockdown of ubiquitin-specific protease 10 (USP10) attenuated the protective effects of LBP in MPP⁺-injured Neural cells. Furthermore, co-immunoprecipitation and immunofluorescence co-localization assays confirmed an interaction between USP10 and Yes-associated protein 1 (YAP1). Deubiquitination experiments indicated that USP10 reduces YAP1 ubiquitination and enhances its protein stability. Additionally, we demonstrated that USP10 suppresses the PERK/eIF2α/ATF-4/CHOP pathway by inhibiting YAP1 ubiquitination, thereby alleviating MPP⁺-induced ERS and apoptosis. In summary, our findings indicate that LBP attenuates MPP⁺-induced neuronal injury by promoting USP10-mediated deubiquitination of YAP1 and subsequently inhibiting the PERK signaling pathway. These findings provide a novel direction and strategy for the clinical treatment of PD, as well as a new avenue for basic research in PD. Background : Endoplasmic reticulum stress (ERS) is an important pathogenesis of Parkinson's disease (PD). Chronic ERS can cause cell apoptosis. Lycium barbarum polysaccharides (LBP) are a type of protein polysaccharide with neuroprotective, anti-inflammatory, and anti-apoptotic effects, and have potential therapeutic effects on neurodegenerative diseases. Objective : This study aims to investigate the neuroprotective effect of LBP on MPP + -induced Neural cells and its potential molecular regulatory mechanism. Method : Neural cell was induced with MPP⁺ for 24 h, followed by LBP treatment for another 24 h. Neural cells were transfected with USP10 and YAP1 overexpression plasmids and specific siRNAs. The PERK pathway inhibitor GSK2606414 was employed to counteract the effects of YAP1 knockdown. Subsequent evaluations encompassed CCK-8 assay for cell viability, Western blotting for ERS related proteins, flow cytometry for cell apoptosis and mitochondrial membrane potential, immunofluorescence for protein localization, calcium probes for intracellular calcium homeostasis. The interaction between USP10 and YAP1 was verified by co-immunoprecipitation. Result : In neural cells, MPP + induces endoplasmic reticulum (ER) swelling, vacuolization, and intracellular calcium imbalance. It concurrently upregulates the expression of endoplasmic reticulum stress markers (GRP78, p-PERK, p-eIF2α, ATF-4, CHOP) and pro-apoptotic proteins (caspase-3, Bax), while downregulating the expression of the anti-apoptotic protein Bcl-2. These changes ultimately promote endoplasmic reticulum stress, oxidative stress, and cellular apoptosis. LBP alleviates these changes by restoring calcium homeostasis and downregulating stress and apoptosis-related proteins, an effect that is abolished by USP10 knockdown. USP10 mediates this protection by inhibiting YAP1 ubiquitination. Notably, the PERK inhibitor GSK2606414 reversed the enhanced expression of apoptotic and stress proteins resulting from YAP1 silencing. Conclusion : These results demonstrate that LBP exerts neuroprotective effects by alleviating MPP+-induced ERS and cell apoptosis. The underlying mechanism involves the upregulation of USP10-mediated deubiquitination of YAP1, which in turn suppresses the activity of the PERK signaling pathway. Our results provide a novel direction and strategy for the clinical treatment of PD, as well as a new avenue for basic research in PD.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.