NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Özet Arka plan: alfa-sinüklein (alfa-sin) agregasyonu, Parkinson Hastalığı (PD) olan hastalarda değişmez olarak gözlemlenen substantia nigra pars compa (SNpc) 'de dopaminerjik nöronların dejenerasyonuna neden olabilir. Ko-chaperone DNAJB6'nın daha önce PD hastalarında kontrol deneklerinden daha yüksek seviyelerde ifade edildiği ve Lewy cisimlerinde de bulunduğu bulunmuştur. Önceki deneylerimiz DNAJB6'nın nakavt edilmesinin hücresel düzeyde alfa-sin agregasyonuna neden olduğunu gösterdi. Bununla birlikte, DNAJB6'nın alfa-sin agregasyonuna karşı aşırı ekspresyonunun etkileri araştırılmaya devam etmektedir. Yöntemler: DNAJB6'nın hücresel düzeyde aşırı ekspresyonunun etkilerini araştırmak için alfa-syn CFP/YFP HEK293 FRET hücre hattını kullandık. Alfa-syn agregasyonu, transfeksiyon alfa-syn preforme fibrilleri (PPF) tarafından indüklendi, daha sonra FRET analizi ölçüldü. DNAJB6b'nin bir hayvan modelinde alfa-sent agregasyonunu ve toksisitesini bozup bozamayacağını araştırmaya devam ettik ve farelerde insan wt alfa-sin, GFP-DNAJB6 veya GFP'yi aşırı eksprese etmek için tasarlanmış adeno ilişkili vira (AAV6) kullandık. Bu vektörler tek taraflı olarak farelerin SNpc'sine enjekte edildi. SNpc'de alfa-sin'i ifade etmek için vira enjekte edilen sıçanlar, alfa-sin ve GFP-DNAJB6'yı ifade eden sıçanlarla karşılaştırıldığında. Motor fonksiyonları, dopaminerjik hücre ölümü, SNpc'de fosforile alfa-sin ve striatumda aksonal dejenerasyonu değerlendirdik. Sonuçlar : DNAJB6'nın bir hücre kültürü modelinde alfa-syn PFF'lerin neden olduğu alfa-syn agregasyonu önlediğini gösteriyoruz. Ayrıca, alfa-sin aşırı ekspresyonunun dopaminerjik hücre ölümüne neden olduğunu ve bunun DNAJB6b'nin eş ekspresyonu ile güçlü bir şekilde azaldığını gözlemledik. Ek olarak, alfa-sin aşırı ekspresyonunun neden olduğu lezyon, DNAJB6b'nin eş ifadesiyle kurtarılan basamak testinde görüldüğü gibi zamanla artan davranış açıklarıyla sonuçlandı. Dahası, DNAJB6 eş ifadesiyle düşürülmüş alfa-sin'i aşırı ifade eden sıçanların SNpc'sinde serin 129 (S129) fosforile alfa-sin'de bir artış gözlemledik. Sonuç : Burada ilk kez DNAJB6'nın hücrelerde ve hayvanlarda alfa-sin agregasyonunun güçlü bir baskılayıcısı olduğunu ve bunun bir hayvan modelinde dopaminerjik hücre ölümünün ve PD ile ilgili motor eksikliklerin bastırılmasıyla sonuçlandığını gösteriyoruz. Anahtar Kelimeler: Protein homeostazisi, Parkinson Hastalığı, Alfa-sinüklein, Adeno Associated Virus, DNAJB6, Isı Şoku Protein 70
Özgün kaynak özetini okuyun
Abstract Background: α-synuclein (α-syn) aggregation can lead to degeneration of dopaminergic neurons in the substantia nigra pars compacta ( SNpc ) as invariably observed in patients with Parkinson’s Disease (PD). The co-chaperone DNAJB6 has previously been found to be expressed at higher levels in PD patients than in control subjects and was also found in Lewy bodies. Our previous experiments showed that knock out of DNAJB6 induced α-syn aggregation in cellular level. However, effects of overexpression of DNAJB6 against α-syn aggregation remains to be investigated. Methods: we used to α-syn CFP/YFP HEK293 FRET cell line to investigate the effects of overexpression of DNAJB6 in cellular level. α-syn aggregation was induced by transfection α-syn preformed fibrils (PPF), then was measured FRET analysis. We proceeded to investigate if DNAJB6b can impair α-syn aggregation and toxicity in an animal model and used adeno associated vira (AAV6) designed to overexpress of human wt α-syn, GFP-DNAJB6 or GFP in rats. These vectors were injected into the SNpc of the rats, unilaterally. Rats injected with vira to express α-syn along with GFP in the SNpc where compared to rats expressing α-syn and GFP-DNAJB6. We evaluated motor functions, dopaminergic cell death, phosphorylated α-syn in SNpc and axonal degeneration in striatum. Results : We show that DNAJB6 prevent α-syn aggregation induced by α-syn PFF’s, in a cell culture model. Also, we observed α-syn overexpression caused dopaminergic cell death and that this was strongly reduced by co-expression of DNAJB6b. In addition, the lesion caused by α-syn overexpression resulted in behavior deficits, which increased over time as seen in stepping test, which was rescued by co-expression of DNAJB6b. Moreover, we observed an increase in serine 129 (S129) phosphorylated α-syn in SNpc of rats overexpressing α-syn, that was lowered by DNAJB6 co-expression. Conclusion : We here demonstrate for the first time that DNAJB6 is a strong suppressor of α-syn aggregation in cells and in animals and that this results in a suppression of dopaminergic cell death and PD related motor deficits in an animal model of PD. Keywords: Protein homeostasis, Parkinson`s Disease, Alpha-synuclein, Adeno Associated Virus, DNAJB6, Heat Shock Protein 70
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.