Optical pulse labeling studies reveal exogenous seeding slows α-synuclein clearance

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Özet Lewy cisimleri (LB'ler) olarak bilinen hücre içi oluşumlarda alfa-sinüklein (alfa-sin) birikimi, Parkinson hastalığı ve Lewy Vücut Demansı da dahil olmak üzere çeşitli nörodejeneratif hastalıklarla ilişkilidir. Alfa-syn ve LB'lerin oluşumunun bu hastalıklarda hücresel işlev bozukluğu ve dejenerasyon ile nasıl ilişkili olduğu konusunda hala sınırlı bir anlayış vardır. Alfa-syn'in açıklık ve üretim dinamiklerini incelemek için, organotipik murin beyin dilim kültürlerini (BSC'ler) rekombinant adeno-ilişkili virüslerle (RAAV'ler) Dendra2-tagged insan vahşi tipini ve mutant A53T alfa-sin'i ifade etmek için, eksojen alfa-syn fibrilar tohumlarının eklenmesiyle ve eksojen olmadan, optik etiketleme kullanarak birkaç hafta boyunca takip ettik. Yabani tip veya mutant A53T insan alfa-sin ifade eden nöronların, çözünmez, fosforile Ser129 alfa-sin biriktiğinde bile benzer alfa-sin ciro oranları gösterdiğini bulduk. Birlikte ele alındığında, bu veriler alfa-sin agregasyonunu ve aşırı ekspresyonu, pSer129 alfa-sin'i ve A53T mutasyonunun bu sistemdeki alfa-sin protein dinamiklerini etkilediğini ortaya koymaktadır. Eksojen alfa-syn fibrilleri ile primon tipi tohumlama, alfa-syn cirosunun kinetiklerini önemli ölçüde değiştirir, bu da anti-p62 immünoreaktivite ve Thiazin Red pozitivitesi birikimi ile ilişkili yavaş açıklık ile sonuçlanır. Alfa-sin agregasyonunun primon tipi indüksiyonu, fibriler tohumların varlığında potansiyel bir protein açıklığına ve bu süreçlerin altında yatan kesin mekanizmaları araştırmak için bu sistemin kolaylığına işaret ederek daha olgun bir LB oluşumuna neden olur. Bu yeni BSC model sistemi, alfa-sin protein dinamiklerinin uzun vadeli kültür dönemlerinde keşfedilmesini kolaylaştırır. Bu platform, alfa-sin cirosunun bu yavaşlamasını neyin tetiklediğine ve terapötiklerin, diğer genlerin veya farklı alfa-sin mutasyonlarının alfa-sin protein dinamiklerini nasıl etkileyebileceğine dair mekanik bir anlayış sağlamak için daha da kullanılabilir.

Özgün kaynak özetini okuyun

Abstract The accumulation of α-synuclein (α-syn) in intracellular formations known as Lewy bodies (LBs) is associated with several neurodegenerative diseases including Parkinson’s disease and Lewy Body Dementia. There is still limited understanding of how α-syn and the formation of LBs is associated with cellular dysfunction and degeneration in these diseases. To examine the clearance and production dynamics of α-syn we transduced organotypic murine brain slice cultures (BSCs) with recombinant adeno-associated viruses (rAAVs) to express Dendra2-tagged human wild-type and mutant A53T α-syn, with and without the addition of exogenous α-syn fibrillar seeds and tracked them over several weeks in culture using optical pulse labeling. We found that neurons expressing wild-type or mutant A53T human α-syn show similar rates of α-syn turnover even when insoluble, phosphorylated Ser129 α-syn has accumulated. Taken together, this data reveals α-syn aggregation and overexpression, pSer129 α-syn, nor the A53T mutation affect the protein dynamics of α-syn in this system. Prion-type seeding with exogenous α-syn fibrils significantly alters the kinetics of α-syn turnover, resulting in slowed clearance associated with the accumulation of anti-p62 immunoreactivity and Thiazin Red positivity. Prion-type induction of α-syn aggregation results in a more mature LB formation, pointing towards a potential protein clearance deficit in the presence of fibrillar seeds and the ease of this system to explore precise mechanisms underlying these processes. This novel BSC model system facilitates the exploration of α-syn protein dynamics over long-term culture periods. This platform can further be exploited to provide mechanistic insight on what drives this slowing of α-syn turnover and how therapeutics, other genes or different α-syn mutations may affect α-syn protein dynamics.

Bilimsel değerlendirme

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.