NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Abstract Background: Olfaktör ekto-mesenkimal kök hücre (OE-MSC), burun mukozasının lamina propriasından kaynaklanan mezenkimal kök hücrelerdir. Nörojenik ve bağışıklık düzenleyici özelliklere sahiptirler ve omurilik travması, işitme kaybı, Parkinson hastalığı, amnezi ve periferik sinir hasarı hayvan modellerinde terapötik potansiyel gösterirler.Bu makalede, klinik uygulamalar için bu kök hücreleri üretmek için insan sağlığı kuruluşları tarafından belirlenen gereksinimleri karşılayan bir protokol tasarladık. Arıtıldıktan sonra, OE-MSC'ler salgıladıkları hücre dışı vezikülleri (EV) elde etmek için genişletilebilir. Bu veziküllerin çıkarılması için bir protokol doğrulandı ve OE-MSC'den EV, anin vitromodel üzerinde fonksiyonel olarak test edildi.Metodlar: Üç vericiden Nazal mukoza biyopsileri, klinik sınıf OE-MSC'nin üretim sürecini doğrulamak için kullanıldı. Tüm aşamalar, A laminar hava akımı gerektiren aseptik işleme manipülasyonlarına göre hücre terapisi laboratuvarının uzman personeli tarafından gerçekleştirildi.Sonuçlar: Enzimatik sindirim daha hızlı bir şekilde yüksek sayıda hücre sağlar ve kirlenme olasılığı daha düşüktür. Foetal buzağı serumu, insan trombosit lizatı ile değiştirildi ve daha güçlü hücre proliferasyonuna izin verdi, trombosit lizatının optimal yüzdesi% 10 oldu. Yetiştirilen OE-MSC'ler sterildir, oldukça proliferatiftir (CFU-F progenitörlerinin yüzdesi% 15,5 idi) ve bakımları kromozomal yeniden düzenlemeyi indüklemiyor (karyotipleme ve kromozomal mikroarray analizi normaldi). Bu hücreler OE-MSC'nin olağan fenotipik belirteçlerini ifade eder. EV'lerin saflaştırılması ultrasantrifügasyon ve boyut dışlama kromatografisi ile gerçekleştirildi. Saflaştırılmış veziküller, EV'lerin tanınmış belirteçlerini ifade etti (hücre dışı veziküllerin çalışmaları için asgari bilgi ("MISEV") kılavuzları) ve nöroblastoma nöro2a hücre hattı modelinde hücre farklılaşmasını ve neurite uzamasını teşvik etti.Sonuçlar: Klinik dereceli koku alma kök hücreleri için daha güvenli ve daha verimli bir üretim süreci geliştirdik, bu hücreler artık insanlarda kullanılabilir. Bir aşama I klinik denemesi yakında başlayacak. OE-MSC EV'lerin saflaştırılması için etkili bir protokol onaylandı. Bu EV'ler in vitro nörojenik özellikler uygularlar. Bu EV'lerin eylem mekanizmalarını tam olarak anlamak ve hayvan modellerinde etkinliğini ve güvenliğini kanıtlamak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.
Özgün kaynak özetini okuyun
AbstractBackground:The olfactory ecto-mesenchymal stem cell (OE-MSC) are mesenchymal stem cells originating from the lamina propria of the nasal mucosa. They have neurogenic and immune-modulatory properties and showed therapeutic potential in animal models of spinal cord trauma, hearing loss, Parkinsons’s disease, amnesia, and peripheral nerve injury.In this paper we designed a protocol that meet the requirements set by human health agencies to manufacture these stem cells for clinical applications. Once purified, OE-MSCs can be usedper seor expanded in order to get the extracellular vesicles (EV) they secrete. A protocol for the extraction of these vesicles was validated and the EV from the OE-MSC were functionally tested on anin vitromodel.Methods:Nasal mucosa biopsies from three donors were used to validate the manufacturing process of clinical grade OE-MSC. All stages were performed by expert staff of the cell therapy laboratory according to aseptic handling manipulations, requiring grade A laminar airflow.Results:Enzymatic digestion provides more rapidly a high number of cells and is less likely to be contaminated. Foetal calf serum was replaced with human platelet lysate and allowed stronger cell proliferation, with the optimal percentage of platelet lysate being 10%. Cultivated OE-MSCs are sterile, highly proliferative (percentage of CFU-F progenitors was 15,5%) and their maintenance does not induce chromosomal rearrangement (karyotyping and chromosomal microarray analysis were normal). These cells express the usual phenotypic markers of OE-MSC. Purification of the EVs was performed with ultracentrifugation and size exclusion chromatography. Purified vesicles expressed the recognized markers of EVs (Minimal Information for Studies of Extracellular Vesicles (“MISEV”) guidelines) and promoted cell differentiation and neurite elongation in a model of neuroblastoma Neuro2a cell line.Conclusions:We developed a safer and more efficient manufacturing process for clinical-grade olfactory stem cells, these cells can now be used in humans. A phase I clinical trial will begin soon. An efficient protocol for the purification of the OE-MSC EVs have been validated. These EVs exert neurogenic propertiesin vitro. More studies are needed to understand the exact mechanisms of action of these EVs and prove their efficacy and safety in animal models.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.