NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Abstract Background: Alfa-sinükleinin (alfa-syn) agregasyonu Parkinson hastalığının (PD) ve diğer sinükleinopatilerin belirgin bir özelliğidir. Bu hastalıklarda, yanlış katlanmış alfa-sin'in hücre dışı yayılması, alfa-sin yanlış katlama patolojisinin prion benzeri bir şekilde hücre hücre hücreye yayılmasına önemli ölçüde katkıda bulunur. Bu nedenle, hücre dışı alfa-sin agregaları, hem teşhis hem de yeni hastalık modifiye terapileri için birincil hedefler olarak kabul edilir. Şu anda, beyin omurilik sıvısı (CSF) kullanan alfa-sin tohum amplifikasyon tahlilleri (SAAs) sinükleinopatiler için en umut verici tanı araçlarını temsil etmektedir. Bununla birlikte, CSF'nin kendisi, alfa-sin'in birikmesini hastaya bağlı bir şekilde modüle edebilen, potansiyel olarak optimize edilmemiş alfa-sin SAA'ları sabote edebilen ve tohum niceliğini önleyebilen birkaç bileşik içerir. Yöntemler: Bu çalışmada, CSF'nin in vitro alfa-sin agregasyonu üzerindeki inhibitör etkisini CSF fraksiyonu, kütle spektrometrisi, nokta-blot, Western blot, iletim elektron mikroskobu, çözelti nükleer manyetik rezonans spektroskopisi, son derece doğru ve standartlaştırılmış bir tanı SAA ve alfa-sin'in spontane agregasyonunu değerlendirmek için farklı in vitro agregasyon koşulları ile karakterize ettik. Bulgular: CSF'nin yüksek molekül ağırlıklı fraksiyonunun (> 100.000 Da) yüksek inhibitör olduğunu ve lipoproteinlerin bu etkinin ana iticileri olduğunu tespit ettik. Lipoprotein ve alfa-sin arasındaki doğrudan etkileşimi değerlendirdik ve iletim elektron mikroskobu ile lipoprotein-alfa-sin komplekslerini gözlemledik. Lipoproteinler ve monomerik alfa-sin arasındaki doğrudan etkileşim, çözelti nükleer manyetik rezonans spektroskopisi tarafından tespit edilmedi ve bunun yerine lipoproteinler ile oligomerik / proto-fibriller alfa-sin ara maddeleri arasındaki etkileşimi düşündürdü. Son olarak, son derece doğru bir tanı SAA'nın reaksiyon karışımına lipoproteinler eklendiğinde, PD CSF'de alfa-sin tohumlarının önemli ölçüde daha yavaş amplifikasyonunu gözlemledik. Sonuç: Sonuçlarımız, alfa-sin fibrillerinin oluşumunu engelleyen ve ilgili biyolojik ve çevirisel etkilere sahip olabilen lipoproteinler ve alfa-sin agregaları arasındaki yeni bir etkileşimi tanımlar. Gerçekten de, CSF'nin alfa-sin agregasyonu üzerindeki donöre özgü inhibisyonu, SAA kaynaklı kinetik parametrelerin analiziyle şimdiye kadar elde edilen nicel sonuçların eksikliğini açıklamaktadır. Ayrıca, verilerimiz apolipoproteinlerin CSF'nin ana inhibitör bileşenleri olduğunu göstermektedir, bu da lipoprotein konsantrasyon ölçümlerinin, CSF milieu'nun alfa-sin niceleme çabaları üzerindeki şaşırtıcı etkilerini ortadan kaldırmak için veri analiz modellerine dahil edilebileceğini düşündürmektedir.
Özgün kaynak özetini okuyun
Abstract Background: Aggregation of α-synuclein (α-syn) is a prominent feature of Parkinson’s disease (PD) and other synucleinopathies. In these diseases, the extracellular spreading of misfolded α-syn significantly contributes to the cell-to-cell propagation of the α-syn misfolding pathology in a prion-like fashion. Therefore, extracellular α-syn aggregates are considered primary targets both for diagnostics and for novel disease modifying therapies. Currently, α-syn seed amplification assays (SAAs) using cerebrospinal fluid (CSF) represent the most promising diagnostic tools for synucleinopathies. However, CSF itself contains several compounds that can modulate the aggregation of α-syn in a patient-dependent manner, potentially sabotaging unoptimized α-syn SAAs and preventing seed quantification. Methods: In this study, we characterized the inhibitory effect of CSF on in vitro α-syn aggregation by means of CSF fractionation, mass spectrometry, dot-blot, Western blot, transmission electron microscopy, solution nuclear magnetic resonance spectroscopy, a highly accurate and standardized diagnostic SAA, and different in vitro aggregation conditions to evaluate spontaneous aggregation of α-syn. Results: We found the high-molecular weight fraction of CSF (>100,000 Da) to be highly inhibitory and identified lipoproteins to be the main drivers of this effect. We evaluated direct interaction between lipoprotein and α-syn and observed lipoprotein-α-syn complexes by transmission electron microscopy. Direct interaction between lipoproteins and monomeric α-syn was not detected by solution nuclear magnetic resonance spectroscopy, suggesting interaction between lipoproteins and oligomeric/proto-fibrillary α-syn intermediates instead. Lastly, we observed significantly slower amplification of α-syn seeds in PD CSF when lipoproteins were added to the reaction mix of a highly accurate diagnostic SAA. Conclusions: Our results describe a novel interaction between lipoproteins and α-syn aggregates that inhibits the formation of α-syn fibrils and could have relevant biological and translational implications. Indeed, the donor-specific inhibition of CSF on α-syn aggregation explains the lack of quantitative results so far obtained by the analysis of SAA-derived kinetic parameters. Furthermore, our data show that apolipoproteins are the main inhibitory components of CSF, suggesting that lipoprotein concentration measurements could be incorporated into data analysis models to eliminate the confounding effects of CSF milieu on α-syn quantification efforts.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.