SCIENTIFIC HUB

Araştırmanın izini sürün.

SCIENTIFIC LITERATURE · PPR

İnsan tükürük pompalı metagenomik için uyarlanmış yarı otomatik DNA ekstraksiyonunun değerlendirilmesi

Evaluation of an adapted semi-automated DNA extraction for human salivary shotgun metagenomics

Makine çevirisi · Editoryal inceleme bekliyor

· 2023-08-23

DOI: 10.21203/rs.3.rs-2762553/v2

Erişim kaynaktan kontrol edilmeliPreprintKaynağa git ↗

Araştırma özeti

Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by

Abstract Oral mikrobiyotanın önemi son zamanlarda Parkinson hastalığında olduğu gibi insan sağlığında vurgulanmıştır, özellikle av tüfeği metagenomik kullanılarak. Verimli av tüfeği metagenomik analizi için önemli bir husus, numune toplama ve muhafazayı iyileştirmek ve aşağı akış analizi için yüksek DNA kalitesi ve miktarı sağlamak için geliştirilen ticari çözümleri genel olarak uygulayan optimal mikrobiyal örnekleme ve DNA ekstraksiyonuna dayanır. Metagenomik çalışmalar bugün çok sayıda örnek üzerinde gerçekleştirildiğinden, çalışma verimini artıran bir sonraki evrim DNA ekstraksiyon otomasyonu iledir. Bu çalışmada, ticari bir kit ile toplanan insan tükürük örnekleri için yarı otomatik bir DNA ekstraksiyon protokolü önerdik ve sonuçları üretici tarafından önerilen DNA ekstraksiyonu ile karşılaştırdık. Protokoller arasında benzer DNA verimleri gözlemlenirken, yarı otomatik DNA protokolümüz önemli ölçüde daha yüksek DNA parça boyutları oluşturdu. Dahası, oral mikrobiyom bileşiminin, tür düzeyinde bile DNA ekstraksiyon yöntemleri arasında eşdeğer olduğunu gösterdik. Bu çalışma, yarı otomatik protokolümüzün pompalı metagenomik analiz için uygun olduğunu gösterirken, daha düşük teknik değişkenliğe sahip ve oral mikrobiyomun yapısından ödün vermeden daha iyi bir örnek tedavi lojistiğine izin veriyor.

Özgün kaynak özetini okuyun

Abstract The importance of oral microbiota has been recently highlighted in human health, such as in Parkinson disease, notably using shotgun metagenomics. One key aspect for efficient shotgun metagenomic analysis relies on optimal microbial sampling and DNA extraction, generally implementing commercial solutions developed to improve sample collection and preservation and provide high DNA quality and quantity for downstream analysis. Because metagenomic studies are today performed on a large number of samples, the next evolution to increase study throughput is with DNA extraction automation. In this study, we proposed a semi-automated DNA extraction protocol for human salivary samples collected with a commercial kit, and compared the outcomes with the DNA extraction recommended by the manufacturer. While similar DNA yields were observed between the protocols, our semi-automated DNA protocol significantly generated higher DNA fragment sizes. Moreover, we showed that the oral microbiome composition was equivalent between DNA extraction methods, even at the species level. This study demonstrates that our semi-automated protocol is suitable for shotgun metagenomic analysis, while allowing for a better sample treatment logistic with reduced technical variability and without compromising the structure of the oral microbiome.

Bilimsel değerlendirme

01

Araştırma sorusu

Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.

02

Yöntem ve örneklem

Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.

03

Temel bulgular

Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.

04

Sınırlılıklar

Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.

Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.