NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Özet Parkinson için ortaya çıkan rejeneratif bir ilaç, insan embriyonik kök hücrelerinden (hESC'ler) veya indüklenmiş pluripotent kök hücrelerden (iPSC'ler) üretilen orta beyin dopaminerjik (mDA) progenitör hücrelerle hücre replasman tedavisidir. Protokoller iyi tanımlanmış olsa da, hESC/iPSC farklılaşma süreci zorlu olmaya devam etmektedir. Ayrıca, farklı klonal iPSC hatları aynı laboratuvarda yürütülen aynı mDA protokolüne değişken yanıtlar verebilir. Yöntemler Bu sorunu çözmek için bir çözüm, mDA farklılaşma verimliliğini öngören gizli biyobelirteçleri belirlemektir. Pluripotent hücrelerden kararlı mDA progenitor hücrelere dönüşürken, hücrelerin salgısını sorgulamak için aday yaklaşımlar ve tarafsız proteomik yöntemler kullandık. Farklı mDA protokollerine (Edinburgh, Kyoto) ve çoklu pluripotent kök hücre hatlarına (RC17, MasterShef7, 1231A3, 404C2) sahip iki laboratuvardan koşullu ortam kullandık. Sonuçlar MDA farklılaşmasının ilk aşamalarında koşullu ortamdaki artış gösteren TFF3, CORIN, PDGFC, SERPINF1 ve NRP1 dahil olmak üzere salgılanmış moleküllerin bir koleksiyonunu belirledik. Yukarı-düzenleme kinetiği ve salgılanmış biyobelirteçlerin bolluğu, her bir hücre hattı için benzersiz imzalar sergiledi. Bununla birlikte, tüm durumlarda biyobelirteç imzalarını mDA farklılaşma verimliliğini öngören mDA protokollerinin 4. günü kadar erken tanımlayabiliriz. Daha sonra, mDA olmayan hücrelerin biyobelirteçlerini keşfetmek için striatal ve kortikal nöronların farklılaştırılmasının sekromunu inceledik, bu da PLAU ve HCAM1'in mDA farklılaşması sırasında düşük kalması gereken tanı belirleyicileri olarak tanımlanmasına yol açtı. Son olarak, beş hESC / iPSC hattı için mDA progenitor hücre üretiminin zaman dilimi boyunca medya örneklerini invazif olmayan bir şekilde analiz edebilen özel Luminex tahlil sistemleri oluşturmak için seçilmiş pozitif ve negatif belirteçleri çoklaştırdık. Sonuç Birden fazla klonal pluripotent kök hücre hattından farklılaşmanın 4. günü için mDA progenitor hücrelerinin üretimini invazif olmayan bir şekilde izlemek için yararlı olan 10'dan fazla salgılanmış biyobelirteçten oluşan bir koleksiyon belirledik.
Özgün kaynak özetini okuyun
Abstract Background An emerging regenerative medicine for Parkinson's is cell replacement therapy with midbrain dopaminergic (mDA) progenitor cells produced from human embryonic stem cells (hESCs) or induced pluripotent stem cells (iPSCs). Although protocols are well described, the process of hESC/iPSC differentiation remains challenging. Furthermore, different clonal iPSC lines can have variable responses to the same mDA protocol conducted in the same laboratory. Methods One solution to address this issue is to identify secreted biomarkers that are predictive of mDA differentiation efficiency. We used candidate approaches and unbiased proteomic methods to interrogate the secretome of cells as they are converting from pluripotent cells to committed mDA progenitor cells. We used conditioned media from two laboratories with different mDA protocols (Edinburgh, Kyoto) and multiple pluripotent stem cell lines (RC17, MasterShef7, 1231A3, 404C2). Results We have identified a collection of secreted molecules, including TFF3, CORIN, PDGFC, SERPINF1, and NRP1, that increase in conditioned media during the early stages of mDA differentiation. The kinetics of up-regulation and abundance of secreted biomarkers exhibited unique signatures for each cell line. However, in all cases we could identify biomarker signatures as early as day 4 of mDA protocols that were predictive of mDA differentiation efficiency. We further examined the secretome of differentiating striatal and cortical neurons to discover biomarkers of non-mDA cells, which led to the identification of PLAU and NCAM1 as diagnostic markers that should remain low during mDA differentiation. Finally, we multiplexed selected positive and negative markers to construct custom Luminex assay systems that can non-invasively analyse media samples during the time-course of mDA progenitor cell production for five hESC/iPSC lines. Conclusion We have identified a collection of over 10 secreted biomarkers useful for non-invasively monitoring the production of mDA progenitor cells for day 4 of differentiation from multiple clonal pluripotent stem cell lines.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.