NeuralCipher Araştırma özeti
Kaynak özetin Türkçe makine çevirisi. Klinik kullanım öncesinde özgün yayınla karşılaştırılmalı; hekim incelemesi değildir. cc by
Özet Alfa-sinüklein (alfa-sin) agregasyonu Parkinson Hastalığı (PD) gibi sinükleinopatilerin gelişimi için kritik öneme sahiptir, ancak bu hastalıklara karşı etkili bir tedavimiz yoktur. Alfa-sin hücre içi Lewy Bodies (LB) 'de çözünmez amiloid olarak birikir, ancak aynı zamanda çözünebilir alfaSO'ları (alfaSO'lar) oluşturur. Bu alfaSO'ların istenmeyen faaliyetlerini tespit etmek ve engellemek için araçlardan yokuz. Bunu ele almak için, değiştirilmemiş alfaSO'lardan lipid peroksidasyon ürünleri ve polifenoller tarafından stabilize edilen türlere, C-terminal olarak kesilen alfa-sin tarafından oluşturulan alfaSO'lara ve kapsid virüs benzeri parçacıklarda (cVLP'ler) alfa-sin'in çok değerli gösterimine kadar farklı alfaSO formlarına karşı monoklonal antikorlar (mAbs) geliştirdik. Burada, bu şekilde elde edilen 30 anti-alfaSO mAb'ın genel biyofiziksel ve immünohistokimyasal özellikleri hakkında rapor veriyoruz. Analizimiz, ELISA ile ilişkili immobilizasyon eserlerinden kaçınan Akış-Sürümlü Dağılım Analizini kullanarak monomerik alfa-sin ve alfaSO'lara in-çözüm afinitesinin doğrudan ölçülmesini içerir. MAb'ler genellikle alfaSO'ları tercih ederken, fibrilleri de bağlarlar, ancak değişken boyutlara kadar. Genel olarak, mAbs'in monomerler ve alfaSO'lar için göreceli afinitelerinde, alfa-sin'in C-terminal uzantısı için çeşitli gereksinimlerde ve sadece alfa-sin fibrilasyon üzerinde mütevazı bir etkide büyük çeşitlilik gözlemliyoruz. Birkaç mAbs, monomerler üzerinde alfaSO'ların monomerler üzerinde büyüklük tercihi için birkaç sıra gösterir, monomerik alfa-sin'den sadece 10 kat daha güçlü bir şekilde alfaSO'lara bağlanan ticari antikor MJF14'ün aksine. Memnun edici bir şekilde, yedi mAbs zar veziküllerinin alfaSO permeabilizasyonunu neredeyse tamamen bloke eder. 16 mAbs, insan alfa-sin'i nigro-straital yolda aşırı ifade eden sıçanlardan beyin bölümlerine bağlanmaları için analiz edildi ve en umut verici beş kişi, insan beyin dokusundaki alfa-sin agregalarını tanıma yetenekleri için daha fazla araştırıldı. Beş mAb'ın hepsi de LB'ler ve Lewy Neurites gibi alfa-sin ilişkili patolojilerin yanı sıra PD tanısı konan insanlardan ölüm sonrası beyinlerde Glial Cytoplasmic Inclusions, LB'ler ile demans ve farklı boyutlarda olmasına rağmen çoklu sistem atrofisi tespit etti. PD'nin erken evreleri de dahil olmak üzere postmortem beyin insan dokusunun patolojik değerlendirmesi için özellikle yararlı olan üç mAb tespit ettik. Bireysel mAbs'in biyofiziksel ve immünohistokimyasal özellikleri arasında doğrudan bir bağlantı olmamasına rağmen, in vitro'daki farklı agrega alfa-sin türlerini tanıyabilen büyük bir mAbs koleksiyonunun da tanısal potansiyele sahip olması teşvik edicidir.
Özgün kaynak özetini okuyun
Abstract Aggregation of α-synuclein (α-syn) is critical to the development of synucleinopathies such as Parkinson’s Disease (PD), yet we do not have any effective therapy against these diseases. α-syn accumulates as insoluble amyloid in intracellular Lewy Bodies (LBs) but also forms soluble αSOs (αSOs) which are thought to be even more cytotoxic than fibrils. We lack tools to detect and block the unwanted activities of these αSOs. To address this, we have raised monoclonal antibodies (mAbs) against different forms of αSOs, ranging from unmodified αSOs to species stabilized by lipid peroxidation products and polyphenols, αSOs formed by C-terminally truncated α-syn, and multivalent display of α-syn on capsid virus-like particles (cVLPs). Here we report on the general biophysical and immunohistochemical properties of 30 anti-αSO mAbs obtained in this fashion. Our analysis includes direct measurement of in-solution affinity to monomeric α-syn and αSOs using Flow-Induced Dispersion Analysis, which avoids immobilization artifacts associated with ELISA. While the mAbs generally show a preference for αSOs, they also bind fibrils, but to variable extents. Overall, we observe great diversity in the mAbs’ relative affinities for monomers and αSOs, varied requirements for the C-terminal extension of α-syn, and only a modest effect on α-syn fibrillation. Several mAbs show several orders of magnitude preference for αSOs over monomers in in-solution studies, in contrast to the commercial antibody MJF14 which only bound 10-fold more strongly to αSOs than monomeric α-syn. Gratifyingly, seven mAbs almost completely block αSO permeabilization of membrane vesicles. 16 mAbs were analyzed for binding to brain sections from rats overexpressing human α-syn in the nigro-striatal pathway, and the five most promising were further investigated for their ability to recognize α-syn aggregates in human brain tissue. All five mAbs identified α-syn-related pathologies like LBs and Lewy Neurites, as well as Glial Cytoplasmic Inclusions in postmortem brains from people diagnosed for PD, dementia with LBs and multiple system atrophy, although to different extents. We have identified three mAbs as particularly useful for pathological evaluation of postmortem brain human tissue, including the early stages of PD. Although there was no straightforward connection between the individual mAbs’ biophysical and immunohistochemical properties, it is encouraging that a large collection of mAbs able to recognize different aggregated α-syn species in vitro also hold diagnostic potential.
Bilimsel değerlendirme
Araştırma sorusu
Sorunun kapsamı orijinal çalışma üzerinden değerlendirilir.
Yöntem ve örneklem
Çalışma tasarımı ve örneklem için kaynak makaleyi kontrol edin.
Temel bulgular
Bu kayıt için editoryal olarak onaylanmış bulgu özeti henüz yayımlanmadı.
Sınırlılıklar
Sonuçların genellenebilirliği, yanlılık ve klinik anlamı ayrıca incelenmelidir.
Bibliyografik veriden yöntem, örneklem veya klinik sonuç çıkarımı yapılmaz.